[发明专利]一种改造的PPP1R12A环状RNA载体及其应用

说明书

本发明公开了一种改造的PPP1R12A环状RNA载体及其应用，其特征是：改造的PPP1R12A环状RNA载体具有启动翻译的能力，如在中间加入一段具有翻译潜力的RNA，PPP1R12A环状RNA载体可稳定的表达该蛋白，进入到免疫动物体内可以产生该蛋白抗体，PPP1R12A环状RNA可以作为疫苗的载体，可用于为预防或治疗的疫苗。

技术领域

本发明属生物技术领域 ，具体地涉及改造的PPP1R12A环状RNA载体，该载体的适当位点插入一段翻译序列之后可以表达该蛋白，载体可以用于多种疫苗的载体。

背景技术

疫苗接种是预防和控制传染病的有效手段，对人类健康产生了巨大的影响。疫苗的品种非常多，根据其性质主要分为减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、树突状细胞疫苗、DNA疫苗及mRNA疫苗等。此外，我国还将疫苗分为免疫规划疫苗和非免疫规划疫苗。

mRNA疫苗是将mRNA传递至细胞， 表达产生蛋白， 进而扩大机体的免疫能力。mRNA疫苗是具有免疫性、安全性及灵活性的基因疫苗，相比传统疫苗，mRNA疫苗不仅能够刺激免疫系统产生平衡、长效的保护，而且能被以Toll 样受体为主的受体识别，进入细胞在胞液中表达，通过刺激免疫系统产生 B和T 细胞等多种机制， 达到预防流行病及抗肿瘤等作用。

mRNA容易受到细胞外普遍存在的核糖核苷酸酶影响而迅速降解，可能在被目标细胞摄取前就失去编码蛋白质的功能。因此，mRNA疫苗稳定性较差、极易被降解问题是其广泛应用限制条件。目前，虽然可以从成体系、密码子优化和修饰核苷等入手提高mRNA自身的稳定，但其稳定性依然是mRNA疫苗最大的挑战。

环状RNA (circRNA) 是一类广泛存在于各种生物中的特殊的非编码RNA，与正常线性RNA不同, 它的3'和5'末端连接在一起形成共价闭合环状结构, 致使缺乏典型的末端结构 (5'帽装结构和3'多聚腺苷酸化)，阻碍核酸外切酶对其降解作用，使得circRNA具有高度保守性和稳定性。研究显示，circRNAs可充当miRNA分子海绵, 竞争内源性RNA, 通过阻断病毒miRNA对其靶mRNA的抑制作用, 发挥抑制病毒miRNA的生物学功能, 从而调节病毒miRNA的活动。此外，circRNA也参与免疫系统的调节。有趣的是，一小部分circRNA可编码蛋白，发挥调控作用。因此，circRNA具有稳定性特点，为circ-mRNA疫苗的设计提供了较强的科学理论。

发明内容

本发明的目的在于提供一种改造的PPP1R12A环状RNA载体和运用。

本发明的目的是这样实现的，通过合成该改建了最后建立包含PPP1R12A环状RNA载体序列以及在第555与556脱氧核酸之前插入编码RNA序列的完成体，可较好的表达插入序列的蛋白，该载体插入适当序列后，可以用于在制备疫苗中的载体，包括现在的制备新冠病毒的疫苗（81460491）。

本发明（优点）：该载体表达蛋白效率高，制作简单，保存容易，作用剂量低。编码SARS-CoV-2病毒抗原的mRNA和疫苗及疫苗的制备方法的专利给予了我们的专利很大参考，本发明在他们的基础上改进了载体在思路上有了新的突破。

附图说明

图1所示转染后的细胞表达了棘突蛋白。

具体实施方式

下面对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

实施例