[发明专利]基于PCR的纯化扩增反应中的控制装置有效

专利信息
申请号: 202110057504.7 申请日: 2021-01-15
公开(公告)号: CN113174326B 公开(公告)日: 2021-12-10
发明(设计)人: 任鲁风;李洁昆;蔡亦梅;范东雨;王宏伟;顾陈;蒋鹏翀;张瑜 申请(专利权)人: 北京中科生仪科技有限公司
主分类号: C12M1/38 分类号: C12M1/38;C12M1/36;C12M1/34;C12M1/02;C12M1/00;B01L7/00
代理公司: 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 代理人: 姜艳华
地址: 100176 北京市大兴区北京经*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 基于 pcr 纯化 扩增 反应 中的 控制 装置
【说明书】:

发明涉及一种基于PCR的纯化扩增反应中的控制装置,该方法包括扩增仓内包含待扩增反应物、冻干球和记忆金属;当所述待扩增反应物进入所述扩增仓内时,记录所述记忆金属在第一温度和第二温度下的第一长度和第二长度;建立第一扰动函数T1(t1i,L1i,Q1i)和第二扰动函数T2(t2i,L2i,Q2i),其中t1i,t2i分别表示第i周期内的第一温度和第二温度,L1i,L2i分别表示第i周期内的对应的记忆金属的长度;Q1i,Q2i分别表示第i周期内的所述待扩增反应物与所述冻干球的混合度。通过在扩增仓内设置记忆金属,使得相关的化学反应在扰动的作用下更为均匀,反应更为充分。

技术领域

本发明涉及核酸检测领域,尤其涉及一种基于PCR扩增仓的温度控制控制方法。

背景技术

在基因芯片检测过程中,温度控制在PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)扩增过程的决定性因素,是决定着是否能够看到荧光信号的关键技术所在。

温控通常包括三个阶段的温度控制,分别为高温(92℃-96℃)、中温(69℃-73℃)和低温(52℃-56℃)。在一个完整的PCR扩增过程中,基因芯片会在高温阶段变性,然后在低温阶段退火,最后在中温阶段延伸,完成上述三个阶段就完成了一次PCR扩增。一般需要多个上述过程才可以达到预定的荧光检测标准。

扩增过程是在扩增仓内完成的,扩增仓设置在管路层内,管路层是待检测芯片的一部分。PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60℃左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72℃左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链,进而完成PCR扩增。

通常为了监测扩增反应的实时温度,需要设置温度传感器及温控装置,利用温控装置对扩增仓的核酸进行温度控制,并且利用温度传感器实时检测扩增仓的实时温度,并根据实时温度调整所述温控装置,以使PCR扩增的各个阶段保持在相应的温度范围内。但是现有的温度监测方法对于温度控制以及调整并不能够十分灵敏,会对PCR反应产生一定的影响,从而影响最后的荧光检测的结果。

发明内容

为此,本发明提供一种基于PCR的纯化扩增反应中的控制装置,根据记忆金属的形状记忆属性以及其在形变过程中对扩增仓内形成的扰动,实现对扩增反应周期内的温度控制及所述待扩增反应物与所述冻干球的混合程度的修正。

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