[发明专利]PCR连续反应的控制方法

说明书

本发明涉及一种PCR连续反应的控制方法，该PCR连续反应的控制方法包括：通过加样孔向管路层注入样品，通过第一试剂管向管路层注入裂解液，形成生成物；通过与第一试剂管连接的第一活塞拉出，将生成物沿着管路推入纯化仓；启动超声单元，超声单元设置在纯化仓的下方，超声单元将纯化仓内的磁珠打散，使得生成物中的核酸物质吸附在磁珠的表面；启动磁吸单元，将磁吸单元内的磁铁推至纯化仓的下方，吸住磁珠；将第三试剂管内的清洗液推入纯化仓，进行至少一次清洗；将核酸物质洗脱，使其与磁珠分离；将核酸推入管路层内的扩增仓；实现扩增反应。本发明实现对PCR连续反应的控制，反应过程管路集成化程度较高，操作简单，易于实现。

技术领域

本发明涉及生物检测领域，尤其涉及一种PCR连续反应的控制方法。

背景技术

核酸的提取、纯化、扩增是核酸检测试验的一项常规操作，也是基因分析过程中十分关键的步骤。基因分析过程中常常需要将特定的核酸片段从混合样品中分离提取出来，用于后续的PCR扩增，因此核酸的纯化回收效果直接影响到整个基因分析过程的进程和结果。

中国专利公开了一种核酸自动检测装置，包括固定座及竖直固定于固定座上的主支撑板、样品反应自动机构及其固定架、核酸检测光路结构及其承载架和控制器；样品反应自动机构固定架固定于主支撑板上，样品反应自动机构的出口向固定架的下方延伸并位于固定架架体之外；核酸检测光路结构承载架位于样品反应自动机构出口的下方并与主支撑板固定连接，核酸检测光路结构的入口与样品反应自动机构的出口连接；控制器设置于固定座上，并分别与样品反应自动机构及核酸检测光路结构电连接。

上述技术方案中，一方面，检测装置对环境要求高，测试精度低，同时，芯片内部管路没有集成化，反应液难以按照预期进行混合及测试，且通常核酸的提取、纯化、扩增需要利用不同的仪器来完成，操作繁琐。

发明内容

为此，本发明提供一种PCR连续反应的控制方法，可以实现对PCR连续反应的控制，便捷高效。

为实现上述目的，本发明提供一种PCR连续反应的控制方法，包括：通过加样孔向管路层注入样品，通过第一试剂管向所述管路层注入裂解液，所述样品和所述裂解液在所述管路层内混合反应，形成生成物；通过与所述第一试剂管连接的第一活塞拉出，以及与所述加样孔连通的第二试剂管内设置的第二活塞推入，将所述生成物沿着管路推入纯化仓；启动超声单元，所述超声单元设置在所述纯化仓的下方，所述超声单元将所述纯化仓内的磁珠打散，使得生成物吸附在所述磁珠的表面；启动磁吸单元，将所述磁吸单元内的磁铁推至所述纯化仓的下方，吸住所述磁珠；将第三试剂管内的清洗液在第三活塞的推动下，推入所述纯化仓，对所述纯化仓内的磁珠进行至少一次清洗；将第四试剂管内的洗脱液在第四活塞的推动下，推入所述纯化仓，将所述磁珠上的所吸附的核酸物质洗脱，使其与所述磁珠分离；通过第二试剂管连接的第二活塞推入，将洗脱后的所述核酸推入管路层内的扩增仓；利用激发光源激发所述扩增仓内的核酸，实现扩增反应；

建立所述超声单元、所述磁吸单元和所述温控单元与中控单元的连接，所述温控单元设置在所述扩增仓的下方，用以对所述扩增仓内的温度进行控制，所述中控单元内设置有标准反应矩阵R0(F0，L0，T0)和时间矩阵t(t1，t2，t3)，其中，F0表示所述超声单元的标准振动频率，L0表示所述磁吸单元的标准位置，T0表示所述温控单元的标准温度，t1表示超声单元的振动时间，t2表示当所述超声单元停止振动后启动所述磁吸单元的时间间隔，t3表示所述磁吸单元停止工作后启动所述温控单元的时间间隔；

在反应过程中，若所述超声单元的实时振动频率F低于所述超声单元的标准振动频率F0，则增加所述超声单元的振动时间t11，更新所述中控单元内的时间矩阵t1(t11，t2，t3),所述超声单元的振动时间t11＝t1(1+F/F0)，启动所述磁吸单元的时间间隔为t21＝t2(1-F/F0)，所述温控单元的时间间隔为t31＝t3(1-F/F0)；