[发明专利]用于特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗体及其用途

说明书

本发明提供了一种特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗体，所述抗体由2条相同的重链和2条相同的轻链组成，其中重链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述重链的可变区的三个抗原决定簇区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.3、4、5所示；所述轻链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述轻链的可变区的三个抗原决定簇区域的氨基酸序列自如SEQ IDNO.6、7、8所示。本发明的抗体能够与地舒单抗特异性结合，从而有效、准确地定性、定量检测血清中的地舒单抗。

技术领域

本发明属于生物化学领域，具体涉及一种用于特异性结合RANKL靶向治疗药物(如地舒单抗和/或其类似物)的抗体、含有该抗体的试剂盒、编码该抗体的核苷酸序列、含有该核苷酸序列的载体、用于制备特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗药抗体的检测试剂的用途、以及用于检测RANKL靶向治疗药物的抗药抗体的方法。

背景技术

地舒单抗(Denosumab)是美国安进(Amgen)公司生产的用于抗骨质疏松和抗骨癌转移的单克隆抗体，该抗体可以特异性结合核因子-κB受体活化因子配体(Receptoractivator of nuclear factor kappa-B ligand，RANKL)，从而阻断RANKL与其膜受体RANK的结合，阻断RANKL-RANK在破骨细胞中的信号转导活化信号。

地舒单抗在用药过程中可能诱发一定程度的抗药性抗体(ADA)，这些抗体可能是无害的、降低药效的、降低药物半衰期的、或危及生命的。FDA(美国食品和药物管理局)和EMA(欧洲药品管理局)都建议并提供指导，在早期和晚期临床试验期间对治疗蛋白产品进行免疫原性试验，以了解ADA对给定药物的影响。ADA的评估和表征是评估生物药物安全性的重要方面。目前最流行的ADA检测方法是基于MSD电化学发光的桥接分析，它提供了稳健和敏感的分析方案，但操作复杂，且不够灵敏。

发明内容

本发明的目的在于针对以上要解决的技术问题，提供一种能够与RANKL靶向治疗药物特异性结合、从而有效并准确检出血清中存在的RANKL靶向治疗药物的抗药抗体。

为实现上述目的，本发明提供了一种特异性结合RANKL靶向治疗药物的抗体，所述抗体由2条相同的重链和2条相同的轻链组成，所述重链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述重链的可变区的三个抗原决定簇区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.3、4、5所示；所述轻链的可变区具有三个抗原决定簇区域，所述轻链的可变区的三个抗原决定簇区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.6、7、8所示。

优选地，所述RANKL靶向治疗药物包括但不限于地舒单抗，优选是地舒单抗或其类似物。

所述抗体优选是通过小鼠免疫方法得到的鼠源单克隆抗体。

作为一种优选的实施方案，所述重链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述轻链的可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了一种试剂盒，其含有所述抗体。优选地，该试剂盒还包括洗涤液、显色液和终止液。

本发明还提供了编码所述抗体的核苷酸序列。

本发明还提供了包含所述载体、用于表达所述抗体的宿主细胞。

另一方面，本发明还提供了所述抗体用于制备检测RANKL靶向治疗药物的抗药抗体的分子诊断试剂的用途。

另一方面，本发明还提供了一种用于检测RANKL靶向治疗药物的抗药抗体的方法，特别是检测血清中存在的RANKL靶向治疗药物的抗药抗体的方法，其采用所述的抗体作为标准品。

优选地，根据所述方法，检测浓度的灵敏度为50ng/ml，检测上限为3200ng/ml。

将本发明的抗体作为标准品，能够有效、准确地检测血清中存在的RANKL靶向治疗药物的抗药抗体。

附图说明