[发明专利]一种CDK2纳米抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种CDK2纳米抗体及其应用，所述CDK2纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。采用本发明提供的CDK2纳米抗体能够特异性结合CDK2蛋白，对CDK2蛋白的灵敏度为0.0325μg/ml。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种CDK2纳米抗体及其应用。

背景技术

骆驼科动物(羊驼、骆驼)和软骨鱼体内的一种天然缺失重链但仍然具有生物活性的特异性抗体称单域抗体，单域抗体的抗原结合位点(VHH)具有独立的抗原识别能力，独立表达的VHH又被称为纳米抗体。与传统的四联体抗体相比，纳米抗体的主要特点有：分子量小，结构简单，理化性质稳定等。纳米抗体的优良特性使其在多种方面具有优势：在抗体进入机体方面，纳米抗体能够穿过动物机体内的一些保护性屏障进入发病部位发挥作用，如血脑屏障、血睾屏障等；在抗原抗体结合方面，能够结合一些隐蔽的抗原表位，特别适用于比较难得到抗体的靶点，如GPCR、离子通道和酶活中心等；在降低生产成本方面，纳米抗体结构简单易于体外表达，同时体外表达不易产生包涵体，生产工艺简单。

目前普遍观点认为，肿瘤产生的本质是细胞增殖调节失控，而细胞增殖需要细胞周期来调控，CDK2是细胞周期中重要激酶。正常情况下，CDK2在细胞周期的表达水平基本保持不变，但在细胞周期的驱动力失控或监控机制受损时，CDK2会异常表达，进而引起细胞周期紊乱导致细胞异常增殖，最终导致癌症发生。大量文献报道，CDK2在肝癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌、前列腺癌、白血病等肿瘤中高度表达，并发现CDK2异常表达是癌变过程中的早期事件，并在癌症的形成、发展过程中起着重要作用。因此，CDK2在早期肿瘤检测、患者预后负向预测指标以及抗癌药物中具有巨大作用。

目前，还没有特异性结合CDK2蛋白的纳米抗体的报道。

发明内容

纳米抗体固有的分子量小、理化特征稳定、亲和力高和结构简单易于重组表达制备，能够穿过血脑屏障，在疾病的诊断与治疗中有较大的应用前景。鉴于此，本发明的目的在于提供一种CDK2纳米抗体及其应用，采用本发明提供的CDK2纳米抗体能够特异性结合CDK2蛋白，灵敏度为0.0325μg/ml。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种CDK2纳米抗体，所述CDK2纳米抗体的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示。

优选的，编码CDK2纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

优选的，所述CDK2纳米抗体的分子量为18KD。

本发明还提供了上述技术方案所述的CDK2纳米抗体在制备结合CDK2蛋白的药物中的应用。

本发明提供了一种CDK2纳米抗体及其应用，所述CDK2纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的CDK2纳米抗体能够特异性结合CDK2蛋白，对CDK2蛋白的灵敏度为0.0325μg/ml。

附图说明

图1为CDK2-VHH-His检测，将纯化的纳米抗体作为待检蛋白进行wester-blot鉴定，使用HRP Anti His-Tag Mouse抗体检测鉴定纯化的纳米抗体。

图2为CDK2-VHH-CDK2纳米抗体检测，选取组织中蛋白样品，将CDK2纳米抗体用作一抗，HRP Anti His-Tag Mouse用作二抗。

图3为脑-CDK2-VHH-纳米抗体免疫组化检测，选取组织中蛋白样品，将CDK2纳米抗体用作一抗，HRP Anti His-Tag Mouse用作二抗。

具体实施方式

本发明提供了一种CDK2纳米抗体，所述CDK2纳米抗体的氨基酸序列如SEQ IDNo.1所示，具体如下：