[发明专利]一种预防宫腔粘连的中药处方在审
| 申请号: | 202110042204.1 | 申请日: | 2021-01-13 |
| 公开(公告)号: | CN112891455A | 公开(公告)日: | 2021-06-04 |
| 发明(设计)人: | 刘文娥;尤昭玲;游卉;谈珍瑜;邹芝香;唐旖旎;文思倩;卢益萍 | 申请(专利权)人: | 湖南中医药大学第一附属医院((中医临床研究所)) |
| 主分类号: | A61K36/8969 | 分类号: | A61K36/8969;A61P15/00;A61K49/00 |
| 代理公司: | 重庆市信立达专利代理事务所(普通合伙) 50230 | 代理人: | 陈炳萍 |
| 地址: | 410007 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 预防 粘连 中药 处方 | ||
1.一种预防宫腔粘连的中药处方,包括以下步骤,其特征在于:
(1):实验动物的选定;
(2):动物造模;
(3):对实验动物进行分组操作,受试对象分为4组,分别为A组(空白对照组):正常大鼠;造模成功后的大鼠按随机数字表分为B组(模型对照组),C组(模型中药组),D组(模型雌激素组);
(4):药物的选定、煎制、混悬液的制备和药物的喂养操作;
(5):对动物进行处理,术后按5天、10天、15天、20天四个时相点于模型组和空白组各取5只鼠处死,先肉眼观察宫腔粘连情况,再取整个宫腔组织作为切片标本,将标本横切+纵切做成切片,镜下观察宫腔狭窄情况、腺体分布情况、胶原纤维分泌及排列情况,记录相关数据;
(6):检验指标;
(7):对数据进行统计分析;
(8):得出中药处方的结论。
2.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(1)中选取无特定病原体(Specefic pathogen Free,SPF)级未交配、雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,鼠龄8-10周,体重220-280g,将大鼠饲养于昼夜各12小时,温度20-26℃,湿度50%-60%环境中,正常采食、饮水,适应性喂养1周后,每天早晨8:00和下午3:00用棉签对大鼠进行阴道涂片并用载玻片在显微镜下判断动情周期,连续涂片两个动情周期(8天),选取其中有规律动情周期的大鼠80只。
3.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(2)和步骤(3)中动物造模采用10%水合氯醛(3ml/kg)对SD大鼠进行腹腔麻醉,常规下腹部备皮后,在无菌条件下消毒大鼠腹壁,模型中药组和模型对照组于下腹部正中,尿道上端1.5cm处纵向切开约2cm切口,逐层进入腹腔,寻找“Y”形子宫并将其暴露,无齿镊稍夹住右侧子宫远端以防药液渗流伤及卵巢组织,用“4”号针头于子宫汇合处向右侧卵巢方向缓慢推注0.04ml苯酚胶浆并停留3min后将子宫内残留的胶浆液回吸干净,操作完毕后消毒创口,将子宫复位,逐层缝合腹壁,待大鼠苏醒后放回笼中饲养观察,空白对照组同上法,于子宫汇合处向右侧卵巢方向缓慢推注0.04ml生理盐水并停留3min后将子宫内残留的生理盐水回吸干净,操作完毕后消毒创口,将子宫复位,逐层缝合腹壁,待大鼠苏醒后放回笼中饲养观察。
4.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(4)中中药成分为熟地、肉苁蓉、菟丝子、覆盆子、桑葚、大血藤、西洋参、佛手、山药、酒黄精、月季花、莲子、三七花。
5.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(4)中制备养膜方的混悬液,参照《中药药理实验方法学》,大鼠剂量(mg/kg)=6.25*人的剂量(mg/kg),根据人与大鼠剂量的折算系数配制成含养膜方0.125g/ml的混悬液,以供使用。
6.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(4)中从造模后第一天起,每天早晚各灌药一次,A组(空白对照组)予以0.9%生理盐水灌胃2ml灌胃,B组(模型对照组)予以0.9%生理盐水灌胃2ml,C组(模型中医药组)予以养膜方混悬液2ml灌胃,D组(模型雌激素组)予以雌激素灌胃。
7.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(6)中包括取下宫腔组织后在镜下观察宫腔粘连程度,按照欧洲妇科内镜协会分级、组织学HE染色+Masson染色、免疫组化法检测血清中TGF-β1、VEGF、IL-6、、ADAMs、YAP、TAZ和TEAD的表达、Western Blot检测的YAP、TAZ、GTGF的表达、RT-PCR检测YAP、TAZ、TEAD蛋白与mRNA的表达变化的表达。
8.根据权利要求1所述的一种预防宫腔粘连的中药处方,其特征在于:步骤(7)中所有实验数据采用SPSS 22.0软件进行统计分析,定量数据以均数±标准差表示,差异统计性检验采用配对t检验,P<0.05表明具有差异具有统计学意义。
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