[发明专利]一种用于梅毒螺旋体全血抗体检测方法

说明书

本发明公开了一种用于梅毒螺旋体全血抗体检测方法，涉及全血样本预处理技术领域，使用方法如下：指尖血取样针刺破指尖；用聚乙烯滴管吸取0.5毫升洗涤液洗脱约100ul指尖血(两滴)，滴入血液样本收集管中；取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升缓冲液滴入血液样本收集管，吹打三次以匀浆；取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升缓冲液滴入血液样本收集管，吹打三次以匀浆，将血液样本收集管在室温10‑35摄氏度的环境静置10分钟；用第三支聚乙烯滴管从血液样本收集管中吸取已预处理的样品0.5毫升。本方法通过使用新设计的缓冲液和胶体金试纸，使对梅毒RPR抗体的检测敏感度得到提升，从而实现对梅毒患者更早的治疗和干预。

技术领域

本发明涉及全血样本预处理技术领域，具体为一种用于梅毒螺旋体全血抗体检测方法。

背景技术

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。

胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

当检测全血样本中的梅毒螺旋体抗体RPR时，往往需要在高危暴露四周后进行，此时血液中梅毒抗体RPR含量较高，不能更早检测到梅毒抗体。

发明内容

本发明专利的目的在于提供一种用于梅毒螺旋体全血抗体检测方法。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于梅毒螺旋体全血抗体检测方法，步骤如下：

S1、指尖血取样针刺破指尖；

S2、用聚乙烯滴管吸取0.5毫升洗涤液洗脱约100ul指尖血(两滴)，滴入血液样本收集管中；

S3、取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升缓冲液滴入血液样本收集管，吹打三次以匀浆；

S4、取另一支聚乙烯滴管吸取0.2毫升缓冲液滴入血液样本收集管，吹打三次以匀浆；

S5、将血液样本收集管在室温10-35摄氏度的环境静置10分钟；

S6、用第三支聚乙烯滴管从血液样本收集管中吸取已预处理的样品0.5毫升，滴到胶体金试纸条的样品垫上，静置15-20分钟读取结果。

优选的，所述洗涤液包括：醋酸钠，所述醋酸钠的摩尔浓度为10mM，所述结合缓冲液的pH值为9.0。

优选的，所述缓冲液包括：Tris盐酸盐、肝素钠、NP40中性表面活性剂、Benzonase核酸酶，所述缓冲液的pH值为8.0；

所述Tris盐酸盐的摩尔浓度为290～310mM，所述肝素钠的添加量为9～11IU，所述NP40中性表面活性剂质量百分含量为0.084～0.12％，所述Benzonase核酸酶的添加量为0.8～1.2IU。

优选的，所述Tris盐酸盐的摩尔浓度为300mM，所述肝素钠的添加量为10IU，所述NP40中性表面活性剂质量百分含量为0.1％，所述Benzonase核酸酶的添加量为1IU。

优选的，所述胶体金试纸条为有含有心卵磷脂的胶体金试纸条。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本方法通过使用新设计的缓冲液和胶体金试纸，使对梅毒RPR抗体的检测敏感度得到提升，从而实现对梅毒患者更早的治疗和干预。

具体实施方式