[发明专利]一种甘露醇的生物制备方法

权利要求书

1.体外多酶催化反应制备甘露醇的方法，其特征在于：

将含有300 g/L可溶性淀粉、5 mM pH 5.5的乙酸钠缓冲液、0.5 mM氯化镁和1 U/mL异淀粉酶，其余为水的1 mL反应混合物，在85℃处理12个小时，得到的液体为300 g/L经异淀粉酶处理的可溶性淀粉溶液；

将含有10 g/L经异淀粉酶处理的可溶性淀粉、10 mM氯化镁、15 mM磷酸二氢钠、100 mM甲酸钠、0.1 mM NAD⁺、200 mM pH 7.4的Tris-HCl缓冲液、2 U/mL αGP、2 U/mL PGM、1 U/mLPGI、1 U/mL M1PDH、1 U/mL M1Pase、1 U/mL FDH，其余为水的1 mL反应混合物在37℃下孵育18 h，然后向体系中加入4GT、PPGK和六偏磷酸钠，使4GT 的含量为1 U/mL、PPGK的含量为1 U/mL 和六偏磷酸钠的含量为5 mM，37℃继续反应至30 h，得到甘露醇；

所述4GT的氨基酸序列如序列表中序列8所示；

所述PPGK的氨基酸序列如序列表中序列9所示。