[发明专利]具有启动子活性的多核苷酸及其在生产目标化合物中的用途有效
| 申请号: | 202110036121.1 | 申请日: | 2021-01-12 |
| 公开(公告)号: | CN113201538B | 公开(公告)日: | 2022-09-16 |
| 发明(设计)人: | 郑平;陈久洲;黄婧文;孙际宾;周文娟;刘娇;马延和 | 申请(专利权)人: | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/77;C12N1/21;C12N9/00;C12N9/02;C12N9/06;C12N9/10;C12N9/12;C12N9/80;C12N9/88;C12N9/90;C12P13/08;C12P13/14;C12P7/46 |
| 代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
| 地址: | 300308 天津*** | 国省代码: | 天津;12 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 具有 启动子 活性 多核苷酸 及其 生产 目标 化合物 中的 用途 | ||
1.一种具有启动子活性的多核苷酸,其中,所述多核苷酸选自如下(i)-(iii)中组成的组中的任一项:
(i)如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;
(ii)如SEQ ID NO:2-3任一序列所示的核苷酸序列;
(iii)如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列的反向互补序列,或如SEQ ID NO:2-3任一序列所示的核苷酸序列的反向互补序列。
2.根据权利要求1所述的具有启动子活性的多核苷酸,其中,所述多核苷酸在盐浓度或渗透压升高的环境中具有提高的启动子活性。
3.一种转录表达盒,其中,所述转录表达盒包含根据权利要求1或2所述的具有启动子活性的多核苷酸。
4.根据权利要求3所述的转录表达盒,其中,所述转录表达盒还含有蛋白编码基因,所述蛋白编码基因与所述具有启动子活性的多核苷酸可操作地连接。
5.一种重组表达载体,其中,所述重组表达载体包含根据权利要求1或2所述的具有启动子活性的多核苷酸,或根据权利要求3-4任一项所述的转录表达盒。
6.一种重组宿主细胞,其中,所述重组宿主细胞包含根据权利要求3-4任一项所述的转录表达盒,或根据权利要求5所述的重组表达载体。
7.根据权利要求6所述的重组宿主细胞,其中,所述宿主细胞来源于棒状杆菌属、短杆菌属、节杆菌属、微杆菌属或埃希氏菌属。
8.根据权利要求7所述的重组宿主细胞,其中,所述宿主细胞为谷氨酸棒杆菌或大肠杆菌。
9.根据权利要求7所述的重组宿主细胞,其中,所述宿主细胞为谷氨酸棒杆菌ATCC13032、谷氨酸棒杆菌ATCC 13869或谷氨酸棒杆菌ATCC 14067。
10.一种根据权利要求1或2所述的多核苷酸,根据权利要求3-4任一项所述的转录表达盒,根据权利要求5所述的重组表达载体,根据权利要求6-9任一项所述的重组宿主细胞在如下至少一种中的用途:
(a)调控基因的转录水平,或制备用于调控基因的转录水平的试剂或试剂盒;
(b)制备蛋白,或制备用于制备蛋白的试剂或试剂盒;
(c)生产目标化合物,或制备用于生产目标化合物的试剂或试剂盒。
11.根据权利要求10所述的用途,其中,所述蛋白选自基因表达调控蛋白或与目标化合物合成相关的蛋白。
12.根据权利要求10所述的用途,其中,所述目标化合物包括氨基酸和有机酸中的至少一种。
13.根据权利要求12所述的用途,其中,所述氨基酸包括赖氨酸、谷氨酸、苏氨酸中的至少一种,所述有机酸包括柠檬酸和琥珀酸中的至少一种。
14.一种调控目标基因转录的方法,其中,所述方法包括将权利要求1-2任一项所述的具有启动子活性的多核苷酸与目标基因可操作地连接的步骤。
15.一种制备蛋白的方法,其特征在于,包括利用根据权利要求3-4任一项所述的转录表达盒,根据权利要求5所述的重组表达载体,或根据权利要求6-9任一项所述的重组宿主细胞表达所述蛋白的步骤。
16.根据权利要求15所述的制备蛋白的方法,其中,所述蛋白为与目标化合物合成相关的蛋白或基因表达调控蛋白。
17.根据权利要求15所述的制备蛋白的方法,其中,所述方法还包括分离或纯化所述蛋白的步骤。
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