[发明专利]一种构建四肢畸形小鼠模型的方法

权利要求书

1.一种构建四肢畸形小鼠模型的方法，利用条件性基因打靶Cre/LoxP系统，其特征在于，将Hnrnpk基因两侧带有同向LoxP位点的标记小鼠，与在组织特异性Prx1的增强子控制下表达Cre重组酶的Prx1-Cre小鼠进行杂交，筛选，获得四肢畸形小鼠模型；所述两个同向的LoxP位点分别位于Hnrnpk基因的4～7号外显子两侧，以Hnrnpk基因的4～7号外显子作为敲除区域。

2.如权利要求1所述的构建四肢畸形小鼠模型的方法，其特征在于，其构建步骤如下：

(1)构建标记的小鼠：通过同源重组的方法构建Hnrnpk基因两侧带有同向LoxP位点的标记小鼠；

(2)构建Cre小鼠：构建在组织特异性Prx1的增强子作用下表达Cre重组酶的Cre小鼠；

(3)将标记小鼠与Cre小鼠杂交，筛选，获得敲除Hnrnpk基因的纯合子小鼠即为四肢畸形小鼠模型。

3.如权利要求2所述的构建四肢畸形小鼠模型的方法，其特征在于，所述步骤(1)构建标记的小鼠的具体方法为：根构建含有同源序列、目的序列、DTA、LoxP、Neo、Amp抗性以及多个限制性酶切位点的质粒，所述质粒的核苷酸如SEQ ID NO:1所示。

4.如权利要求2所述的构建四肢畸形小鼠模型的方法，其特征在于，所述Prx1的增强子序列如SEQ ID NO:2所示。

5.由权利要求1或2所述的构建四肢畸形小鼠模型的方法制备获得的四肢畸形小鼠模型在制备或筛选治疗四肢畸形药物中的应用。

6.提高Hnrnpk基因表达水平的制剂或药物在制备提高肢芽间质祖细胞活性或该细胞增殖或延缓该细胞凋亡的制剂或药物中的应用。