[发明专利]一种长期抗污染的基于人血清白蛋白分子印迹聚合凝胶的电化学生物传感器的制备方法

说明书

本发明属于电化学生物传感器领域，具体涉及一种长期抗污染的基于人血清白蛋白分子印迹聚合凝胶的电化学生物传感器的制备方法。该方法通过以下步骤实现：首先将玻碳电极预处理，制备海藻酸钠混合溶液，将混合溶液滴加至预处理的玻碳电极表面，滴加钙盐溶液，反应结束后，采用十二烷基硫酸钠溶液洗脱模板蛋白分子，得电化学生物传感器。本发明制备的蛋白质分子印迹聚合凝胶，在实现对目标分子的选择性检测的同时，能够长期（25天）有效地消除真实样品中其他蛋白质（细菌）在传感界面上的非特异性吸附，从而显著提高了传感器的特异性和准确性及抗污染能力，具有高度的选择性结合能力，准确性高，操作简单，灵敏度高且制备流程简单、成本低。

技术领域

本发明属于电化学生物传感器领域，具体涉及一种长期抗污染的基于人血清白蛋白分子印迹聚合凝胶的电化学生物传感器的制备方法。

背景技术

分子印迹聚合物具有模拟天然受体的分子是被能力，越来越成为一类重要的人工合成材料。目前，现有的人血清白蛋白分子印迹聚合物主要以球形或柱状等其他形状的物质为依托制备而成，该方法存在以下缺点：其一，球形或其他形状的依托材料制备繁杂；其二，此类技术合成的分子印迹聚合物与电极表面的连接受限，导致其很难直接应用于传感器领域；其三，此类技术制备的分子印迹聚合物几乎没有消除或降低其他蛋白质非特异性吸附的能力，直接削弱了其在实际样品中对目标的分析检测能力。电化学是一种应用比较广泛的测试手段，其自身具有超高的灵敏性。因此，电化学技术与抗污染蛋白质分子印迹聚合凝胶的结合，能够有效的消除其他蛋白质的干扰，提高生物分析的选择性、灵敏度和准确性。

现有技术中，绝大多数生物传感器在实际样品（包括血液、血清、汗液、尿液、组织提取液、细胞粉碎液等）检测中遭遇其他蛋白质的非特异性吸附以及细胞的黏附从而导致传感器的选择性低、灵敏度差、准确性低等问题。目前，尚未有以人血清白蛋白为模板分子制备长期抗污染材料的相关报道。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种长期抗污染的基于人血清白蛋白分子印迹聚合凝胶的电化学生物传感器的制备方法。

本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

本发明提供了一种长期抗污染的基于人血清白蛋白分子印迹聚合凝胶的电化学生物传感器的制备方法，包括以下步骤：

1）电极的预处理：玻碳电极GCE分别在不同浓度的氧化铝悬浮液中抛光，超声，先后用乙醇和水冲洗；

2）混合溶液的配制：将海藻酸钠溶解在KOH溶液中，搅拌混匀，加入蒸馏水，搅拌至均一得海藻酸钠溶液；加入人血清白蛋白，得混合溶液；

3）移取混合溶液滴加至预处理的玻碳电极表面，滴加钙盐溶液，反应结束后，采用十二烷基硫酸钠溶液洗脱模板蛋白分子，得电化学生物传感器。

进一步的，步骤（1）中，所述氧化铝悬浮液的浓度为1.0、0.3、0.05 µm；所述冲洗的时间为3min。

进一步的，步骤（2）中，所述海藻酸钠在KOH溶液中的浓度为0.05g/mL；所述KOH溶液的浓度为0.1 mol/L；所述蒸馏水和KOH溶液溶液的体积比为5：2。

进一步的，步骤（2）中，所述人血清白蛋白在混合溶液中的浓度为5.0 mg/mL。

进一步的，步骤（3）中，所述玻碳电极每1支表面滴加7.0 µL混合溶液；所述钙盐溶液的浓度为0.1 g/mL，滴加量为0.05-0.1mL；所述钙盐为氯化钙。

进一步的，步骤（3）中，所述十二烷基硫酸钠溶液的浓度为10% (W/V)。

本发明还提供了一种利用上述制备方法制备的电化学生物传感器在血清蛋白质检测中的应用。

本发明的有益效果为：