[发明专利]一种外周血miRNA结肠癌诊断标志物组合及其检测试剂盒

权利要求书

1.一种检测外周血miRNA标志物组合的试剂在制备诊断结肠癌的试剂盒中的应用，其特征在于，所述试剂盒检测用于miRNA标志物的相对表达量；所述的miRNA标志物组合包括以下六种miRNA的组合：hsa-miR-1324、hsa-miR-20b-5p、hsa-miR-216b-5p、hsa-miR-367-5p、hsa-miR-597-5p和hsa-miR-934。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述miRNA标志物组合为hsa-miR-1324、hsa-miR-20b-5p、hsa-miR-216b-5p、hsa-miR-367-5p、hsa-miR-597-5p和hsa-miR-934的组合；通过检测每种标志物的ΔCt值后输入判别公式：

-0.430-2.065*ΔCt miR1324-0.647*ΔCt miR20b+0.995*ΔCt miR216b-0.630*ΔCtmiR367-2.337*ΔCt miR597-0.158*ΔCt miR934。

3.一种用于结肠癌诊断的外周血miRNA标志物组合在制备结肠癌检测试剂或工具中的应用，其特征在于，所述miRNA标志物组合为权利要求1中所述六种miRNA的组合。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述试剂盒中包括检测权利要求1所述的外周血miRNA标志物相对表达量的qPCR扩增引物和试剂，进行反转录及qPCR扩增。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的引物序列如SEQ ID NO.1-6所示，作为内参的U6的qPCR扩增引物。

6.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的试剂为poly-A加尾法反转录试剂和qPCR法检测试剂。

7.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的用于结肠癌检测试剂盒还包括阳性质控品、阴性质控品、poly-A加尾酶、逆转录酶、dNTPs、逆转录缓冲液、无RNA酶水、qPCR缓冲液、氯化镁、DNA聚合酶、SYBR Green荧光染料中的至少一种。