[发明专利]一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的lncRNA标志物及其应用

说明书

本发明属于分子遗传学技术领域，具体为一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的lncRNA标志物及其应用，所述lncRNA标志物为lnc‑88672，核苷酸序列为SEQ ID NO.1。本发明首次发现lnc‑88672表达与猪骨骼肌卫星细胞的增殖相关，并随着猪日龄的不断增加lnc‑88672的表达不断降低，从而提供了一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的lncRNA标志物，通过检测lnc‑88672的表达可以鉴定猪骨骼肌卫星细胞的增殖情况，抑制lnc‑88672的表达可以促进猪骨骼肌卫星细胞增殖，为针对猪骨骼肌肉生长发育的临床研究提供新的思路和方法。

技术领域

本发明属于分子遗传学技术领域，具体涉及一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的lncRNA标志物及其应用。

背景技术

骨骼肌作为人类和动物躯体的重要组成部分，约占其总体重的40％。骨骼肌的生长发育离不开成肌细胞的增殖分化，细胞的增殖与分化之间保持动态平衡对动物机体的生长发育至关重要。骨骼肌卫星细胞位于肌纤维膜与基底膜之间，属于肌源性干细胞，具有较强的增殖、分化潜能，可作为体外探究猪肌肉形成过程的良好模型，对探索猪肌肉生长发育过程具有重要指导意义。猪肉作为人类所食用的重要肉类产品来源，能提供给人类优质的蛋白质，并含有丰富的营养物质，又因为其产肉性状是非常重要的经济性状，研究意义重大。

长链非编码RNA(lncRNA)是指一类主要由Pol II转录且长度大于200nt不具有或有很弱编码能力的RNA，占非编码RNA的80％之多。近年来研究不断发现lncRNA在骨骼肌的生长发育中发挥着重要作用。如Myolinc可以通过将TDP-43募集到Filip1或者肌肉标记基因(例如MyoD)的启动子中以顺式方式调节其转录，从而促进成肌细胞分化为肌细胞并融合成肌管；lncRNA Snhg8能够通过调控核糖体上某种蛋白基因的转录来调节骨骼肌卫星细胞的增殖过程；Sirt1 AS lncRNA与Sirt1 mRNA相互作用形成RNA双链体，通过与miR-34a竞争促进Sirt1翻译抑制骨骼肌形成；lncRNA MAR1能够充当miR-487b海绵来调节Wnt5a蛋白，从而促进骨骼肌分化和再生。然而在肌肉发育过程中，有关lncRNA的调控作用研究多集中在小鼠和其它一些模式动物上，在猪骨骼肌发育过程中的调控作用还需进一步研究。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的lncRNA标志物；本发明的目的之二在于提供一种lnc-88672在调控猪骨骼肌生长发育中的应用；本发明的目的之三在于提供一种检测组织中lnc-88672的试剂在制备鉴定猪骨骼肌卫星细胞增殖的产品中的应用；本发明的目的之四在于提供一种提高猪骨骼肌卫星细胞增殖的方法；本发明的目的之五在于提供一种含有抑制lnc-88672的表达的试剂或化合物在促进调控猪骨骼肌生长发育中的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种与猪骨骼肌卫星细胞增殖相关的lncRNA标志物，所述lncRNA标志物为lnc-88672，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2、lnc-88672在调控猪骨骼肌生长发育中的应用。

3、检测组织中lnc-88672的试剂在制备鉴定猪骨骼肌卫星细胞增殖的产品中的应用。

作为优选的技术方案之一，所述试剂用于检测lnc-8867的基因序列。

作为优选的技术方案之一，所述鉴定猪骨骼肌卫星细胞增殖的产品为荧光定量PCR试剂盒。

作为优选的技术方案之一，所述荧光定量PCR试剂盒内含有特异性检测lnc-8867的上游引物和下游引物，上游引物序列为SEQ ID NO.4，下游引物序列为SEQ ID NO.5。

4、一种提高猪骨骼肌卫星细胞增殖的方法，在原代猪骨骼肌卫星细胞中通过基因突变或基因沉默抑制lnc-88672的表达。