[发明专利]一种称量斑马鱼胚胎和幼鱼重量的方法

说明书

本发明公开一种称量斑马鱼胚胎和幼鱼重量的方法。在用新鲜培养液冲洗待称量样品后，吸取斑马鱼胚胎或幼鱼，放入离心管中备用；将滤膜放入真空抽滤漏斗，加去离子水，开启真空泵，待漏斗上方无可见液体后，计时抽滤；抽滤结束后，取下滤膜，将滤膜放置干燥器中，然后称量重量记为M1；重复，称量重量记为M2；将醋酸纤维素滤膜再放入抽滤装置，加去离子水，开启真空泵，待漏斗上方无可见液体后，取N个斑马鱼胚胎滴加到滤膜上，计时抽滤；取下滤膜，称量重量记为M3；将滤膜放入抽滤装置，加去离子水，开启真空泵，待漏斗上方无可见液体后，计时抽滤，取下滤膜，称量重量记为M4；计算斑马鱼胚胎重量M＝(M4+M3‑M2‑M1)/2N。方法称量准确。

技术领域

本发明涉及生命科学技术领域，具体涉及一种定量斑马鱼胚胎重量的方法，适用于对斑马鱼胚胎和幼鱼的重量进行定量。

背景技术

斑马鱼和人类基因高度同源，这意味着斑马鱼实验结果大多数情况下适用于人类，因此斑马鱼是一种使用非常广泛的模式生物。斑马鱼性情温和、繁殖力强，成熟斑马鱼每隔几天可产卵一次，每次可产卵200枚，胚胎在24小时内就可发育成形，这使得实验人员可以在同一代鱼身上进行不同的实验，进而研究病理演化过程并找到病因。此外，斑马鱼胚胎通体透明，显微镜下各组织清晰可见，实验人员很容易观察到药物或者毒物对其体内器官的影响，因此斑马鱼胚胎广泛用于药物研究和毒理学研究。在毒理学研究中，斑马鱼胚胎的重量也是一个重要的指标，然而，目前没有简单、准确定量斑马鱼胚胎重量的方法。

发明内容

鉴于现有技术中存在的问题，本发明提出一种称量斑马鱼胚胎和幼鱼重量的方法。

本发明为解决上述技术问题，采用的技术方案是一种称量斑马鱼胚胎和幼鱼重量的方法，包括如下步骤：

(1)在用新鲜培养液冲洗待称量样品后，吸取斑马鱼胚胎或幼鱼，放入离心管中备用；

(2)将滤膜放入真空抽滤漏斗，加去离子水，开启真空泵，待漏斗上方无可见液体后，计时抽滤；

(3)抽滤结束后，取下滤膜，将滤膜放置干燥器中，然后称量重量记为M1；

(4)重复步骤(2)和(3)，称量重量记为M2；

(5)将步骤(4)中的醋酸纤维素滤膜再放入抽滤装置，加去离子水，开启真空泵，待漏斗上方无可见液体后，用吸管吸从步骤(1)中的离心管取N个斑马鱼胚胎滴加到滤膜上，计时抽滤；

(6)取下滤膜，称量重量记为M3；

(7)将步骤(6)中的滤膜放入抽滤装置，加去离子水，开启真空泵，待漏斗上方无可见液体后，计时抽滤，取下滤膜，称量重量记为M4；

(8)计算斑马鱼胚胎重量M＝(M4+M3-M2-M1)/2N。

本发明滤膜是孔径0.22μm或者0.45μm的醋酸纤维素滤膜。

本发明滤膜的直径要小于抽滤漏斗的内径。

本发明抽滤过程中加入的为去离子水，体积为50ml-100ml。

本发明抽滤时间为20min-40min。

本发明称量工具为十万分之一天平或者是万分之一天平。

本发明新鲜培养液为E3培养液，其成分为5mmol/L NaCl，0.17mmol/L KCl，0.33mmol/L CaCl₂，0.33mmol/L MgSO₄，pH 7.4。

有益效果：

本发明操作简单，使用的是实验室常规仪器，且计算方法简便，不会对研究者的后续实验造成负担。能够准确称量出单个或者多个斑马鱼胚胎或幼鱼的重量。

具体实施方式