[发明专利]PARP抑制剂联合CAR-T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明公开了PARP抑制剂联合CAR‑T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明研究发现PARP抑制剂可以促进肿瘤微环境中CD8⁺CAR‑T细胞的浸润，使低剂量CAR‑T治疗同样能够达到肿瘤完全消退的效果，有望为CAR‑T细胞免疫治疗中细胞因子风暴的控制提供新的方案。

技术领域

本发明属于生物医药和细胞生物学技术，具体涉及PARP抑制剂联合CAR-T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

CAR-T细胞是由单克隆抗体的单链可变区和T细胞信号转导区连接而成，抗体与相应的肿瘤抗原结合后能以主要组织相容性复合体以非限制性方式使T细胞活化，进而发挥抗肿瘤效应。

目前，第二代CAR-T仍处于研究的主流地位，对于血液瘤而言具有较好的疗效，2017年就有两款CAR-T疗法获批上市，用于治疗急性淋巴细胞白血病的Kymriah和治疗非霍奇金淋巴瘤的Yescarta。基于血液瘤治疗的成功，第三、四代CAR-T应运而生，扩增和杀伤能力都得到了明显的改善，因此研究者们将其应用于实体瘤的治疗中，并研究不同肿瘤抗原作为靶点时CAR-T的治疗效果。

虽然CAR-T在治疗实体瘤中取得了初步的疗效，但其药效逊于血液瘤。这主要与实体瘤的特性相关，与血液瘤相比，实体瘤治疗需要解决更多的难题。除去少数研究使用的瘤内注射方式，CAR-T的给药方式主要还是集中在静脉输注，CAR-T细胞需要从外周血中循环至肿瘤部位才能发挥杀伤作用。相较于血液瘤所处的均质环境，实体瘤所处的环境复杂多变，阻碍了CAR-T的浸润。CAR-T疗法无疑为癌症治疗带来新希望，然而，这种疗法也有严重不良反应，主要是细胞因子释放综合征(也叫细胞因子释放风暴，CRS)和神经毒性。如果处理不及时可能会危及生命。所以输注CAR-T细胞后必须严密监测。

肿瘤微环境是指肿瘤产生和生存的内环境，主要由肿瘤细胞、细胞外基质、周围血管、其他细胞(如免疫细胞和成纤维细胞)以及各种分泌因子等组成。越来越多的研究表明，抑制性肿瘤微环境促进了肿瘤的生长和转移，阻碍了免疫细胞的应答并抑制抗肿瘤疗法的疗效。

发明内容

发明目的：针对上述CAR-T在实体瘤中面对的困境，本申请提供了PARP抑制剂联合CAR-T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

技术方案：本申请公开了PARP抑制剂联合CAR-T细胞在制备抗肿瘤药物中的应用。

其中，所述PARP抑制剂优选为Olaparib。

所述PARP抑制剂促进CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润。

进一步的，所述PARP抑制剂促进CD8⁺CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润，减少CD4⁺CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润。

其中，所述CAR-T细胞为低剂量2.5×10⁶CAR-T/mice。

本申请还公开了PARP抑制剂在制备用于CAR-T细胞治疗的辅助剂中的用途。

其中，所述PARP抑制剂优选为Olaparib。

所述PARP抑制剂促进CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润。

进一步的，所述PARP抑制剂促进CD8⁺CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润，减少CD4⁺CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润。

具体地，本申请根据动物实验，PARP抑制剂50mg/kg剂量一周内给药4次，并在每两次之间注射CAR-T细胞，可以有效的促进CAR-T细胞在肿瘤微环境中的浸润，显著的促进肿瘤负荷小鼠肿瘤的消退。