[发明专利]一种通过评估分析物的溶剂效应对亲和力实验的影响来指导SPR检测前处理的方法有效
| 申请号: | 202110010480.X | 申请日: | 2021-01-06 |
| 公开(公告)号: | CN112683857B | 公开(公告)日: | 2022-10-14 |
| 发明(设计)人: | 单雪莲;荣乃燕;王卓智 | 申请(专利权)人: | 上海药明生物医药有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/552 | 分类号: | G01N21/552;G01N1/28 |
| 代理公司: | 上海浦一知识产权代理有限公司 31211 | 代理人: | 郑权 |
| 地址: | 201403 上海市奉*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 通过 评估 分析 溶剂 效应 亲和力 实验 影响 指导 spr 检测 处理 方法 | ||
1.一种通过评估分析物的溶剂效应对亲和力实验的影响程度来指导SPR检测前处理的方法,其特征在于,包括:
1)所述分析物取样,检测bulk和R0,其中,bulk是指所述分析物最高工作浓度结合阶段时在参比通道产生的信号,且bulk3500RU,R0是指分析物最高工作浓度在结合阶段时配体通道扣减参比通道后结合信号值;计算bulk/R0比值;
2)对于高亲和力、中亲和力的反应,当bulk/R0≤10时,分析物无需换液,直接进行SPR检测;当10bukl/R050时,根据对于图谱的要求,决定是否换液;当bulk/R0≥50时,需要先换液再进行SPR检测;
对于低亲和力的反应,当bulk/R0≤10时,分析物无需换液,直接进行SPR检测;当10bukl/R020时,根据对于图谱的要求,决定是否换液;当bulk/R0≥20时,需要先换液后再进行SPR检测;
其中,高亲和力是指分析物的相互作用对KD1nM,中亲和力是指分析物的相互作用对1nM≤KD≤100nM,低亲和力是指分析物的相互作用对KD100nM;
所述对于图谱的要求是指,在扣减后的图谱中,在结合阶段开始前和结束后是否出现凸起和下凹的小峰;如果不消除图谱中出现的凸起和下凹的小峰,则分析物无需换液,直接进行SPR检测;如果要消除图谱中出现的凸起和下凹的小峰,需要先换液后再进行SPR检测。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述分析物的溶剂效应是由高折光率添加剂产生,所述高折光率添加剂选自海藻糖、甘露醇、蔗糖、甘油或氨基酸中的任意一种或多种。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述高折光率添加剂为海藻糖。
4.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述高折光率添加剂为甘露醇。
5.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述高折光率添加剂为蔗糖。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,高亲和力的分析物的相互作用对为Trastuzumab-Human HER2。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,中亲和力的分析物的相互作用对为mAb1-Ag1。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,低亲和力的分析物的相互作用对为Rituximab-CD32a(H167)。
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