[发明专利]一种新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统及方法

权利要求书

1.一种新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统的生产方法，所述灌流生产系统包括：

细胞反应器，用于培养表达S1蛋白的细胞株；

灌流系统，包括过滤装置、出液管、回液管和第一循环泵，所述过滤装置的主体内设有孔径为0.1-0.2μm的中空纤维柱，用于过滤透出液，截留细胞培养液中的S1蛋白；

所述出液管的两端分别与所述细胞反应器和所述中空纤维柱的下端相连通；

所述回液管的两端分别与所述细胞反应器和所述中空纤维柱的上端相连通；

所述第一循环泵设置于所述出液管与所述中空纤维柱相连的管路中，所述第一循环泵为蠕动泵；

还包括导出管和蛋白纯化装置，所述导出管的第一端与所述细胞反应器相连，所述蛋白纯化装置与所述导出管的第二端相连，用于定期取出一定体积的细胞培养液并从中纯化出S1蛋白；其特征在于，所述生产方法包括：

将表达S1蛋白的细胞以0.5-0.6×10⁶cells/ml密度接种，控制细胞反应器内的培养参数，培养参数包括：搅拌转速为80-130rpm，溶氧量为40%-60%，pH值为7.0，温度为37℃，得到适宜细胞生长的培养环境，细胞为HEK293细胞改造的表达S1蛋白的稳定细胞株；

细胞密度达到4-5×10⁶cells/ml后开始灌流，灌流体积为每天1-2倍培养体积，循环流速为2-3L/min，使细胞密度维持在30-40×10⁶cells/ml峰值范围内，当细胞反应器内的细胞密度达到设定峰值范围30-40×10⁶cells/ml 后，每天通过导出管取出0.2-0.5倍培养体积的细胞培养液，并从取出的细胞培养液中纯化出S1蛋白，当细胞反应器内细胞存活率低于80%，全部导出进行纯化，得到S1蛋白。

2.根据权利要求1所述的新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统的生产方法，其特征在于，所述过滤装置连接有第二循环泵，用于排出透出液。

3.根据权利要求2所述的新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统的生产方法，其特征在于，所述细胞反应器的底部设有称重器。

4.根据权利要求3所述的新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统的生产方法，其特征在于，还包括相互连接的导入管和第三循环泵，且所述导入管与所述细胞反应器相连，用于补入与排出的透出液重量相等的新鲜培养基。

5.根据权利要求4所述的新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统的生产方法，其特征在于，所述第二循环泵和所述第三循环泵为蠕动泵。

6.根据权利要求1所述的新冠病毒S1蛋白的灌流生产系统的生产方法，其特征在于，所述细胞反应器内设有搅拌装置。