[发明专利]I-B型CRISPR相关转座酶系统在审
| 申请号: | 202080091286.2 | 申请日: | 2020-10-30 |
| 公开(公告)号: | CN114981423A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
| 发明(设计)人: | 斋藤谅;F·张;G·福雷 | 申请(专利权)人: | 博德研究所;麻省理工学院 |
| 主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/10;C12N15/85;C12N15/113;A61K48/00;A61K38/45;A61P31/04;A61P35/00;A61P35/02 |
| 代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平;袁泉 |
| 地址: | 美国马*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | crispr 相关 转座酶 系统 | ||
1.一种工程化系统,所述系统包含:
a.一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶;
b.一种或多种I-B型Cas蛋白;和
c.指导分子,所述指导分子能够与所述I-B型Cas蛋白复合并引导指导物-Cas蛋白复合物与靶多核苷酸的结合。
2.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和/或TniQ。
3.如权利要求2所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC、第一TniQ和第二TniQ,其中所述第一TniQ和所述第二TniQ是不同的。
4.如权利要求2所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和TniQ。
5.如权利要求4所述的系统,其中所述TniQ包含DNA结合结构域。
6.如权利要求5所述的系统,其中所述DNA结合结构域位于所述TniQ的C末端。
7.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和/或TnsD。
8.如权利要求7所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC、第一TnsD和第二TnsD,其中所述第一TnsD和所述第二TnsD是不同的。
9.如权利要求7所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和TnsD。
10.如权利要求9所述的系统,其中所述TnsD包含DNA结合结构域。
11.如权利要求9所述的系统,其中所述TnsA和TnsB包含在单一蛋白质中。
12.如权利要求9所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含:
a.TnsA、TnsB、TnsC和TnsD1;
b.TnsA、TnsB、TnsC和TnsD2;或
c.TnsA、TnsB、TnsC、TnsD和TnsD2。
13.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种I-B型Cas蛋白包含Cas5、Cas6、Cas7和/或Cas 8。
14.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种I-B型Cas蛋白包含Cas 8b。
15.如权利要求14所述的系统,其中所述Cas8b是Cas8b3。
16.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶和/或所述一种或多种I-B型Cas蛋白来自或源自多变鱼腥藻。
17.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种I-B型Cas蛋白缺乏核酸酶活性。
18.如权利要求1所述的系统,其还包含供体多核苷酸。
19.如权利要求18所述的系统,其中所述供体多核苷酸包含多核苷酸插入物、左侧元件序列和右侧元件序列。
20.如权利要求18所述的系统,其中所述供体多核苷酸:
a.向所述靶多核苷酸引入一个或多个突变;
b.在所述靶多核苷酸中校正提前终止密码子;
c.破坏剪接位点;
d.恢复剪接位点;或
e.其组合。
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