[发明专利]I-B型CRISPR相关转座酶系统在审

专利信息
申请号: 202080091286.2 申请日: 2020-10-30
公开(公告)号: CN114981423A 公开(公告)日: 2022-08-30
发明(设计)人: 斋藤谅;F·张;G·福雷 申请(专利权)人: 博德研究所;麻省理工学院
主分类号: C12N9/22 分类号: C12N9/22;C12N15/10;C12N15/85;C12N15/113;A61K48/00;A61K38/45;A61P31/04;A61P35/00;A61P35/02
代理公司: 北京市金杜律师事务所 11256 代理人: 陈文平;袁泉
地址: 美国马*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: crispr 相关 转座酶 系统
【权利要求书】:

1.一种工程化系统,所述系统包含:

a.一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶;

b.一种或多种I-B型Cas蛋白;和

c.指导分子,所述指导分子能够与所述I-B型Cas蛋白复合并引导指导物-Cas蛋白复合物与靶多核苷酸的结合。

2.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和/或TniQ。

3.如权利要求2所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC、第一TniQ和第二TniQ,其中所述第一TniQ和所述第二TniQ是不同的。

4.如权利要求2所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和TniQ。

5.如权利要求4所述的系统,其中所述TniQ包含DNA结合结构域。

6.如权利要求5所述的系统,其中所述DNA结合结构域位于所述TniQ的C末端。

7.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和/或TnsD。

8.如权利要求7所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC、第一TnsD和第二TnsD,其中所述第一TnsD和所述第二TnsD是不同的。

9.如权利要求7所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含TnsA、TnsB、TnsC和TnsD。

10.如权利要求9所述的系统,其中所述TnsD包含DNA结合结构域。

11.如权利要求9所述的系统,其中所述TnsA和TnsB包含在单一蛋白质中。

12.如权利要求9所述的系统,其中所述Tn7转座酶包含:

a.TnsA、TnsB、TnsC和TnsD1;

b.TnsA、TnsB、TnsC和TnsD2;或

c.TnsA、TnsB、TnsC、TnsD和TnsD2。

13.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种I-B型Cas蛋白包含Cas5、Cas6、Cas7和/或Cas 8。

14.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种I-B型Cas蛋白包含Cas 8b。

15.如权利要求14所述的系统,其中所述Cas8b是Cas8b3。

16.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种CRISPR相关Tn7转座酶和/或所述一种或多种I-B型Cas蛋白来自或源自多变鱼腥藻。

17.如权利要求1所述的系统,其中所述一种或多种I-B型Cas蛋白缺乏核酸酶活性。

18.如权利要求1所述的系统,其还包含供体多核苷酸。

19.如权利要求18所述的系统,其中所述供体多核苷酸包含多核苷酸插入物、左侧元件序列和右侧元件序列。

20.如权利要求18所述的系统,其中所述供体多核苷酸:

a.向所述靶多核苷酸引入一个或多个突变;

b.在所述靶多核苷酸中校正提前终止密码子;

c.破坏剪接位点;

d.恢复剪接位点;或

e.其组合。

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