[发明专利]用于含有多核苷酸的样品的增强扩增的微流体盒

说明书

本文描述的技术总体上涉及微流体盒。该技术更具体地涉及应用于微流体盒的可压缩垫，其中微流体盒被配置为扩增盒中的微流体通道内的特别是并行地来自多个生物样品的感兴趣核苷酸，并且允许检测那些核苷酸。本技术的可压缩垫可以实施在具有增强反应腔室体积的微流体盒中，从而导致盒中的改善的热均匀性和扩增效率。使用本技术的微流体盒的测定有利地表现出改善的检测限(LOD)和改善的定量限(LOQ)。

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年10月2日提交的美国临时申请号62/909628的优先权，其通过引用整体并入本文。

技术领域

本文描述的技术总体上涉及微流体盒。在一个方面中，该技术更具体地涉及应用于微流体盒的可压缩垫，其中微流体盒被配置为接收和扩增感兴趣核苷酸。在另一方面中，该技术涉及具有反应腔室的微流体盒，该反应腔室被配置为接收和扩增来自处理样品的更大体积的流体洗出液。本文描述的盒的实施例可以在盒中的微流体通道内并行扩增来自若干生物样品的感兴趣核苷酸，并允许检测那些核苷酸。

背景技术

分子诊断测试中测定的灵敏度取决于若干因素。这些因素包括在处理样本以获得准备扩增的样品期间的提取效率、样品的扩增效率和在扩增过程期间在反应体积中实现的热均匀性、以及其他因素。增加反应体积的尺寸有助于扩增效率的改善，导致改善的检测限(LOD)和改善的定量限(LOQ)。改善反应体积和热源之间的热连通的均匀性和分布有助于改善热均匀性。

一种当前的微流体盒实施方式具有反应腔室，该反应腔室具有约4μL的反应体积。存在与包括具有这种小反应体积的反应腔室的盒相关联的显著优点。然而，随着反应腔室的体积减小，可能出现与实现期望的分析灵敏度相关联的挑战。同时，随着反应腔室的体积增加以实现改善的扩增效率并克服目标递送限制，可能出现与实现热均匀性相关联的挑战。因此，需要克服这些挑战并实现改善的扩增效率和热均匀性的微流体盒，从而导致具有改善的检测限(LOD)和改善的定量限(LOQ)的测定。

本文包括对本技术背景的讨论以解释本技术的背景。这不应被视为承认所提及的任何材料在任何权利要求的优先权日是公开的、已知的或公知常识的一部分。

遍及说明书的描述和权利要求，词语“包括”及其变体(例如“包括”和“包含”)并不旨在排除其他添加、组分、整体或步骤。

发明内容

本技术包括用于改善跨微流体装置的压力分布、增加微流体装置内的热均匀性并增强在微流体装置中进行的扩增的参数的方法和装置。本技术的实施方式改善了在微流体通道内扩增感兴趣核苷酸的微流体装置的特征。本技术包括用于改善那些核苷酸的检测的方法和装置。

本技术的微流体装置可以与加热组件相互作用，该加热组件将热施加到微流体装置中发生扩增的多个腔室。加热组件可以包括被配置为接触微流体装置的加热器阵列。在一些情况下，加热组件压靠微流体装置以放置加热器阵列与微流体装置热连通。在其他情况下，微流体装置压靠加热组件以放置加热器阵列与微流体装置热连通。根据本技术的微流体装置的实施例可以包括可压缩垫，该可压缩垫改善施加到微流体装置的压力的分布并增加递送到微流体装置的热的均匀性。本技术的可压缩垫可以增加施加到微流体装置的压力的均匀性，导致减少的热损失并改善在微流体装置的多个腔室中发生的扩增的一致性和效率。

本技术的微流体装置还可以通过将扩增腔室体积从约4μL的体积增加到约25μL的体积来实现改善的测定灵敏度，同时在扩增过程期间仍然实现跨腔室的最佳热均匀性。本技术的更大体积扩增腔室可以接收含有从样本提取的DNA/RNA目标分析物的更大体积的流体洗出液，从而增加测定灵敏度。在一些情况下，与当前的微流体装置相比，本技术的微流体装置实现了反应腔室体积的六倍增加。当本技术的这些更大体积的反应腔室与本技术的可压缩垫相关联的改善的压力分布和热均匀性组合时，如通过改善的检测限(LOD)和定量限(LOQ)所测量的，测定性能增加。