[发明专利]开发用于发现治疗性抗体的高效杂交瘤平台

权利要求书

1.一种用于产生抗体文库的方法，所述方法包括：

(a)对一只或多只动物注射抗原；

(b)从每只动物收获包含B细胞的引流淋巴结；

(c)在每个B细胞与融合配偶体之间形成杂交瘤；以及

(d)针对对所述抗原的结合特异性筛选所述杂交瘤；

其中应用以下条件中的至少两个条件：

(i)所述动物为远交动物；

(ii)在多个部位处对所述动物进行注射；

(iii)每两周对所述动物进行注射；

(iv)对所述动物进行注射6周至15周；

(v)使用多种佐剂，使得不同的动物被注射不同的佐剂；

(vi)在步骤(c)之前富集B细胞；和/或

(vii)使用经改造以表达表面和分泌的IgG两者的融合配偶体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vii)中的两个条件。

3.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vii)中的三个条件。

4.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vii)中的四个条件。

5.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vii)中的五个条件。

6.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vii)中的六个条件。

7.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vii)中的七个条件。

8.根据权利要求1所述的方法，其中应用条件(i)至(vi)中的至少两个条件。

9.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括对两只或更多只动物注射抗原。

10.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括对三只或更多只动物注射抗原。

11.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括对四只或更多只动物注射抗原。

12.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(a)包括对五只或更多只动物注射抗原。

13.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中所述动物为大鼠。

14.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中所述多个部位为引流淋巴结附近的部位。

15.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中所述多个部位包括背部、肩部、腹膜内、尾根和跗关节中的一个部位或多个部位。

16.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中在多个部位处对所述动物进行注射，并且在每个部位处注射的抗原的量介于0.1μg与300μg之间。

17.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中在多个部位处对所述动物进行注射，并且在每个部位处注射的抗原的量介于0.5μg与200μg之间。

18.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中不超过每周一次对所述动物进行注射。

19.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中不超过每两周一次对所述动物进行注射。

20.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中对所述动物进行注射6周至15周。

21.根据以上权利要求中任一项所述的方法，其中所述多种佐剂包括完全弗氏佐剂、Ribi和/或TLR激动剂混合物。