[发明专利]用于组织递送的材料的分析

权利要求书

1.表征用于递送试剂的递送媒介物的方法，其包括：

(a)配制具有不同化学组成的多种脂质纳米颗粒(LNP)递送媒介物，其中每种不同的LNP递送媒介物包含：

(i)生物活性分子，其在通过所述LNP递送媒介物递送至至少两种非人哺乳动物的细胞的细胞质时产生可检测信号；以及

(ii)化学组成标识符，其鉴定所述LNP递送媒介物中每一种的化学组成；

(b)将多种LNP递送媒介物施用至至少一种所述非人哺乳动物物种的多个组织；

(c)从所述非人哺乳动物的多个组织中分选产生所述可检测信号的细胞和不产生所述可检测信号的细胞，其中产生所述可检测信号的细胞还基于是否存在指示组织类型或细胞类型的细胞表面蛋白进行分选；以及

(d)鉴定产生所述可检测信号的分选细胞中的化学组成标识符，以确定所述分选细胞中LNP递送媒介物的化学组成，从而使所述LNP递送媒介物的化学组成与含有所述LNP递送媒介物的组织或细胞类型相关联。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述LNP递送媒介物还包含待递送的试剂。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述两种非人哺乳动物选自小鼠、大鼠和非人灵长类动物。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述试剂是核酸试剂。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述核酸试剂包括RNA、DNA或者RNA和DNA的组合。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述可检测信号指示通常在所述细胞中表达的基因的下调。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述下调导致以下中的一种或多种的表达降低：β-2-微球蛋白、CD47、CD81、AP2S1、LGALS9、ITGB1、ITGA5、CD45、TIE2、MGAT4B、MGAT2、VAMP3和GPAA1。

8.如权利要求6所述的方法，其中所述产生可检测信号的生物活性分子是siRNA、反义寡核苷酸或DNA转基因。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述DNA转基因表达shRNA。

10.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述可检测信号指示通常在所述细胞中表达的基因的上调。

11.如权利要求9所述的方法，其中所述产生可检测信号的生物活性分子是mRNA或DNA转基因。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述mRNA是修饰的mRNA，与未修饰的mRNA相比，所述修饰的mRNA增强所述可检测信号的产生和/或降低免疫原性。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述修饰的mRNA包含以下中的一种或多种：5’-端帽、5’-非翻译区(UTR)、3’-UTR、3’-聚腺苷酸化、密码子优化和碱基修饰。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述化学组成标识符是核酸条形码。

15.如权利要求14所述的方法，其还包括对所述核酸条形码进行测序以鉴定所述LNP递送媒介物的化学组成。

16.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述非人哺乳动物是非人灵长类动物，向所述非人哺乳动物施用所述多种LNP递送媒介物。

17.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述产生可检测信号的生物活性分子包含DNA转基因。