[发明专利]营养缺陷型选择方法

权利要求书

1.产生分化细胞群体的方法，其包括：

(a)使多个祖细胞与包含靶向基因启动子的非必需部分的向导RNA(gRNA)的CRISPR/Cas系统接触；

(b)通过同源重组双等位基因插入包含组织特异性启动子和至少一部分基因的构建体，导致所述祖细胞是营养缺陷型因子营养缺陷型的，其中所述基因选自：AACS、AADAT、AASDHPPT、AASS、ACAT1、ACCS、ACCSL、ACO1、ACO2、ACSS3、ADSL、ADSS、ADSSL1、ALAD、ALAS1、ALAS2、ALDH1A1、ALDH1A2、ALDH1A3、ALDH1B1、ALDH2、AMD1、ASL、ASS1、ATF4、ATF5、AZIN1、AZIN2、BCAT1、BCAT2、CAD、CBS、CBSL、CCBL1、CCBL2、CCS、CEBPA、CEBPB、CEBPD、CEBPE、CEBPG、CH25H、COQ6、CPS1、CTH、CYP51A1、DECR1、DHFR、DHFRL1、DHODH、DHRS7、DHRS7B、DHRS7C、DPYD、DUT、ETFDH、FAXDC2、FDFT1、FDPS、FDXR、FH、FPGS、G6PD、GCAT、GCH1、GCLC、GFPT1、GFPT2、GLRX5、GLUL、GMPS、GPT、GPT2、GSX2、H6PD、HAAO、HLCS、HMBS、HMGCL、HMGCLL1、HMGCS1、HMGCS2、HOXA1、HOXA10、HOXA11、HOXA13、HOXA2、HOXA3、HOXA4、HOXA5、HOXA6、HOXA7、HOXA9、HOXB1、HOXB13、HOXB2、HOXB3、HOXB4、HOXB5、HOXB6、HOXB7、HOXB8、HOXB9、HOXC10、HOXC11、HOXC12、HOXC13、HOXC4、HOXC5、HOXC6、HOXC8、HOXC9、HOXD1、HOXD10、HOXD11、HOXD12、HOXD13、HOXD3、HOXD4、HOXD8、HOXD9、HRSP12、HSD11B1、HSD11B1L、HSD17B12、HSD17B3、HSD17B7、HSD17B7P2、HSDL1、HSDL2、IBA57、IDO1、IDO2、IL4I1、ILVBL、IP6K1、IP6K2、IP6K3、IPMK、IREB2、ISCA1、ISCA1P1、ISCA2、KATNA1、KATNAL1、KATNAL2、KDM1B、KDSR、KMO、KYNU、LGSN、LSS、MARS、MARS2、MAX、MITF、MLX、MMS19、MPC1、MPC1L、MPI、MSMO1、MTHFD1、MTHFD1L、MTHFD2、MTHFD2L、MTHFR、MTRR、MVK、MYB、MYBL1、MYBL2、NAGS、ODC1、OTC、PAICS、PAOX、PAPSS1、PAPSS2、PDHB、PDX1、PFAS、PIN1、PLCB1、PLCB2、PLCB3、PLCB4、PLCD1、PLCD3、PLCD4、PLCE1、PLCG1、PLCG2、PLCH1、PLCH2、PLCL1、PLCL2、PLCZ1、PM20D1、PPAT、PSAT1、PSPH、PYCR1、PYCR2、QPRT、RDH8、RPUSD2、SCD、SCD5、SLC25A19、SLC25A26、SLC25A34、SLC25A35、SLC7A10、SLC7A11、SLC7A13、SLC7A5、SLC7A6、SLC7A7、SLC7A8、SLC7A9、SMOX、SMS、SNAPC4、SOD1、SOD3、SQLE、SRM、TAT、TFE3、TFEB、TFEC、THNSL1、THNSL2、TKT、TKTL1、TKTL2、UMPS、UROD、UROS、USF1、USF2、VPS33A、VPS33B、VPS36、VPS4A和VPS4B；

(c)使所述多个祖细胞与所述营养缺陷型因子接触；

(d)刺激所述祖细胞分化成与组织特异性启动子相关的组织，其中所述基因响应于分化而表达；以及

(e)去除所述营养缺陷型因子，从而选择分化细胞以产生所述分化细胞群体。

2.如权利要求1所述的方法，其还包括使所述多个祖细胞与5-FOA接触。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述基因是UMPS基因。