[发明专利]从修饰的CD247基因座表达嵌合受体的细胞、相关多核苷酸和方法

权利要求书

1.一种基因工程化的T细胞，其包含修饰的CD247基因座，所述修饰的CD247基因座包含编码嵌合受体的核酸序列，所述嵌合受体包含含有CD3zeta(CD3ζ)信号传导结构域的细胞内区域。

2.根据权利要求1所述的基因工程化的T细胞，其中所述核酸序列包含编码所述嵌合受体的一部分的转基因序列，所述转基因序列已经任选地经由同源定向修复(HDR)整合于T细胞的内源CD247基因座处。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的基因工程化的T细胞，其中整个CD3ζ信号传导结构域或所述CD3ζ信号传导结构域的片段是由所述内源CD247基因座的开放阅读框或其部分序列编码。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中编码所述嵌合受体的所述核酸序列包含以下的框内融合物：(i)编码所述嵌合受体的一部分的转基因序列，和(ii)所述内源CD247基因座的开放阅读框或其部分序列。

5.一种基因工程化的T细胞，其包含修饰的CD247基因座，所述修饰的CD247基因座包含编码嵌合受体的核酸序列，所述嵌合受体包含含有CD3zeta(CD3ζ)信号传导结构域的细胞内区域，其中所述核酸序列包含以下的框内融合物：(i)编码所述嵌合受体的一部分的转基因序列，和(ii)编码所述CD3ζ信号传导结构域的内源CD247基因座的开放阅读框或其部分序列。

6.根据权利要求2-5中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所述转基因序列与所述内源CD247基因座的开放阅读框或其部分序列的一个或多个外显子同框。

7.根据权利要求2-6中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所述转基因序列不包含编码3'UTR的序列和/或不包含内含子。

8.根据权利要求2-7中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中：

所述转基因序列编码所述CD3ζ信号传导结构域的片段或者不编码所述CD3ζ信号传导结构域或其片段。

9.根据权利要求3-8中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所述开放阅读框或其部分序列包含所述内源CD247基因座的至少一个内含子和至少一个外显子，和/或编码所述内源CD247基因座的3'UTR。

10.根据权利要求2-9中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所述转基因序列位于所述内源CD247基因座的开放阅读框的外显子1的下游和外显子8的上游；任选地所述内源CD247基因座的开放阅读框的外显子1的下游和外显子3的上游。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所编码的嵌合受体的所述CD3ζ信号传导结构域的至少一个片段，任选地整个CD3ζ信号传导结构域，是由所述内源CD247基因座的开放阅读框或其部分序列编码，任选地其中所述CD3ζ信号传导结构域是由包含所述内源CD247基因座的开放阅读框的外显子2和外显子3-8的至少一部分的核苷酸序列编码；或者是由不包含所述内源CD247基因座的开放阅读框的外显子1、不包含外显子1的全长和/或不包含外显子2的全长的核苷酸序列编码。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所编码的嵌合受体能够经由所述CD3ζ信号传导结构域进行信号传导。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的基因工程化的T细胞，其中所编码的CD3ζ信号传导结构域包含选自SEQ ID NO:13-15中任一项的序列，或者展现与SEQ ID NO:13-15中任一项至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高序列同一性的序列，或者其片段。