[发明专利]具有增强的细胞色素C活性的L-氨基酸生产微生物及使用其的L-氨基酸生产方法

说明书

提供了具有增强的细胞色素C活性的L‑氨基酸生产微生物，以及使用该微生物的L‑氨基酸生产方法。

技术领域

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年12月23日向韩国知识产权局提交的KR 10-2019-0173087和KR 10-2019-0173088的权益，其全部公开内容通过引用并入本文。

提供了一种具有增强的细胞色素C活性的L-氨基酸生产微生物和使用该微生物生产L-氨基酸的方法。

背景技术

属于棒状杆菌属(Corynebacterium)的微生物是革兰氏阳性的，并且已广泛用于生产L-氨基酸。L-氨基酸，尤其是L-赖氨酸，在动物饲料工业以及人类医学和化妆品工业中获得应用。对于工业应用，L-氨基酸大部分是通过使用棒状杆菌属菌株发酵而产生的

已经进行了许多尝试来改进使用棒状杆菌属菌株生产L-氨基酸的方法。其中之一是重组DNA技术的研究，通过该技术可操纵特定基因以敲低或减弱表达从而生产L-氨基酸。另外，已经进行了这样的研究，即扩增并分析了参与L-氨基酸生物合成的每种基因对L-氨基酸生产的影响，从而修饰生产L-氨基酸的棒状杆菌属菌株。

在通过发酵生产赖氨酸的工业中，生产高浓度的赖氨酸和微生物的改善的赖氨酸生产潜力是重要因素。因此，一直在努力增强微生物的赖氨酸生产潜力并在发酵培养过程中稳定地维持改善的赖氨酸生产潜力。然而，由于各种内外因素对微生物活性的抑制，很难将赖氨酸生产潜力维持到培养后期。

因此，仍然需要开发一种L-赖氨酸生产潜力得到提高并且可以稳定保持的菌株。

发明内容

技术问题

一种实施方式提供了具有增强的细胞色素C活性的L-氨基酸生产微生物。例如，细胞色素C活性的增强可以通过引入细胞色素C编码基因来实现。例如，细胞色素C编码基因可以是外源基因。

另一种实施方式提供了一种生产L-氨基酸的方法，该方法包括培养L-氨基酸生产微生物的步骤。

又一种实施方式提供了用于在微生物中生产L-氨基酸或改善L-氨基酸生产的组合物，该组合物包含细胞色素C编码基因、携带该基因的重组载体或它们两者。

技术方案

根据本文提供的实施方式，基于对棒状杆菌属(Corynebacterium spp.)微生物中参与赖氨酸生产的基因的扩增如何影响其赖氨酸生产潜力的研究，提出了一种用于氨基酸生产的菌株修饰技术。通常，提高诸如赖氨酸等氨基酸的生产潜力的策略包括提高赖氨酸等氨基酸的生产收率或增加单位时间内诸如赖氨酸等氨基酸的输出量(生产率)。特别地，赖氨酸等氨基酸生产力可能受到多种因素的影响，包括发酵培养基的组分、发酵培养基的渗透压、搅拌速度、供氧速率等。在培养一段时间后，微生物的赖氨酸生产潜力和细胞活性由于诸如以下问题而稳步降低：发酵液中存在的各种物质和代谢物造成的压力、微生物质量增加导致的氧气消耗、诸如温度和搅拌速度等物理条件。根据本公开的实施方式，提供了一种菌株修饰技术，以克服这些各种因素造成的压力，并使微生物在培养后期保持恒定的目标产物生产活性。

下面，将给出本公开的详细描述。

一种实施方式提供了具有增强的细胞色素C活性的L-氨基酸生产微生物。

如本文所用，术语“L-氨基酸生产微生物”可以指具有L-氨基酸生产潜力的微生物，这种L-氨基酸生产潜力通过增强其中的细胞色素C活性而相比之前有所增加和/或通过增强其中的细胞色素C活性而从无活性产生。如本文所用，术语“微生物”可旨在涵盖单细胞细菌，并且可与“细胞”互换使用。

L-氨基酸可以是L-赖氨酸。