[发明专利]改变DUX4 pre-mRNA剪接的反义寡核苷酸

说明书

本文确立了面肩肱型肌营养不良的新疗法。一种能够将DUX4基因的剪接从DUX4‑fl转换为DUX4‑s的寡核苷酸或其药学上允许的盐，其中所述寡核苷酸包含与序列编号1的核苷酸序列组成的DUX4‑fl mRNA的核苷酸编号502～556或578～612的区域互补的核苷酸序列组成的、碱基数为15～30的寡核苷酸，其5’末端和/或3’末端可以被化学修饰。一种包含所述寡核苷酸或其药学上允许的盐的药物(例如，面肩肱型肌营养不良的治疗药)。

技术领域

本发明涉及改变DUX4 pre-mRNA剪接的反义寡核苷酸。

背景技术

面肩肱型肌营养不良(Facioscapulohumeral muscular dystrophy：FSHD)是在面颊部、肩胛骨周围和上臂肌肉表现强烈的肌肉萎缩和肌无力的肌营养不良(非特许文献1：Tawil R.and Van Der Maarel S.M.Muscle Nerve 2006，34：1-15)。发病期非常广，从0岁到60多岁不等，但一般从十几岁左右开始，以举臂困难、不能吹口哨、面部表情少等症状发病。虽然症状进展缓慢，但损伤逐渐波及下肢，产生行走障碍的情况较多。另外，就肌肉损伤程度而言，左右侧不同的情况较多。肌病理学发现，肌营养不良除了观察到常见的肌肉纤维的坏死和再生之外，还观察到了炎症细胞的浸润(非专利文献2：Arahata等人，MuscleNerve 1995，2：S56-S66)。除了骨骼肌症状外，还观察到了许多神经性耳聋、网膜症的并发症(非专利文献3：Padberg等人，Muscle Nerve 1995，2：S73-S80)。它被认为紧随杜氏肌营养不良和肌强直性肌营养不良之后的常见的肌肉疾病，据报道患病率在欧美为每1.4至2万人中1人(非专利文献4：Padberg等人，Muscle Nerve 1995，2：S81-S84；Flanigan等人，Neuromuscul Disord 2001，11：525-529；非专利文献5：Mostacciuolo等人，Clin Genet2009，75：550-555；非专利文献6：Norwood等人，Brain 2009，132：3175-3186；非专利文献7：Deenen等人，Neurology 2014，83：1056-1059)。

虽然引起FSHD的遗传因素非常复杂，但现在普遍相信Lemmers等人在2010年发表的“DUX4基因的去抑制”理论(非专利文献8：Lemmers等人，Science 2010，329：1650-1653)。FSHD采用显性遗传的形式，疾病与4号染色体长臂末端(4q35区域)关联(非专利文献9：Wijmenga等人，Nat Genet 1992，2∶26-30)。在该4q35区域中，存在一个被称D4Z4的、3.3kb序列重复的区域(D4Z4重复)，正常重复11-100次，呈现高度DNA甲基化的异染色质状态。大约95％的FSHD患者的其中一条的第4号染色体的D4Z4重复减少为10次以下，其结果导致4q35区域的DNA甲基化减少(非专利文献10：van Overveld等人，Nat Genet 2003，35：315-317)。显示这种D4Z4重复缩短的类型被称为FSHD1型。另外，约5％的FSHD患者的D4Z4重复数量正常，但发生了DNA甲基化的减少，被称为FSHD2型。目前，已知FSHD2型的甲基化减少的原因是参与D4Z4重复的甲基化的SMCHD1基因的功能缺陷突变所致(非专利文献11：Lemmers等人，Nat Genet 2012，44：1370-1374)。