[发明专利]包含电荷修饰的珠蛋白的抗肿瘤的细胞

权利要求书

1.一种抗肿瘤的细胞、脂质体或微团，其包含至少一种与所述细胞、脂质体或微团的膜相关联的电荷修饰的珠蛋白。

2.如权利要求1所述的细胞，其特征在于，所述细胞为免疫细胞，优选肿瘤浸润免疫细胞，更优选淋巴细胞、中性粒细胞、树突状细胞或巨噬细胞。

3.如权利要求1或2所述的细胞，其特征在于，所述细胞为细胞毒性T细胞、自然杀伤T细胞或自然杀伤细胞。

4.如前述权利要求任一项所述的细胞，其特征在于，所述细胞为T细胞。

5.如权利要求1所述的脂质体或微团，其特征在于，所述脂质体或微团包含治疗剂；优选地，其中所述治疗剂为检查点抑制剂、免疫治疗剂或化疗剂。

6.如前述权利要求任一项所述的细胞、脂质体或微团，其特征在于，所述珠蛋白为血红蛋白、肌红蛋白、神经珠蛋白或细胞珠蛋白；优选肌红蛋白。

7.如前述权利要求任一项所述的细胞、脂质体或微团，其特征在于，所述珠蛋白连接至次级抗肿瘤分子或用于连接至次级抗肿瘤分子的反应性官能团；

优选地，其中所述次级抗肿瘤分子为抗体、凝集素、整合素或粘附分子中的任意一种；

和/或，优选地，其中所述次级抗肿瘤分子为：(1)肿瘤细胞结合分子；(2)检查点抑制剂；(3)重组肿瘤细胞外基质的酶；或(4)代谢肿瘤相关化合物的酶。

8.如权利要求7所述的细胞、脂质体或微团，其含有包括所述珠蛋白和所述次级抗癌分子的融合蛋白。

9.如前述权利要求任一项所述的细胞、脂质体或微团，其特征在于，所述珠蛋白为阳离子化珠蛋白或阴离子化珠蛋白。

10.如前述权利要求任一项所述的细胞、脂质体或微团，其特征在于，所述珠蛋白包含聚合物表面活性剂包被。

11.一种药物组合物，其包含如前述权利要求任一项所述的抗肿瘤的细胞、脂质体或微团，其进一步包含药学上可接受的载体、稀释剂或载体。

12.如权利要求1-10任一项所述的细胞、脂质体或微团、或如权利要求11所述的药物组合物，在癌症治疗中的应用。

13.一种制备如权利要求1-10任一项所述的抗肿瘤的细胞、脂质体或微团的方法，其包括：

a)提供电荷修饰的珠蛋白；和

b)将所述抗肿瘤的细胞、脂质体或微团与所述珠蛋白接触。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于，步骤(a)包括在能够使所述聚合物表面活性剂与所述珠蛋白静电偶联的条件下提供电荷修饰的珠蛋白和聚合物表面活性剂。

15.如权利要求13或14所述的方法，其特征在于，珠蛋白通过包括以下步骤的方法转化为电荷修饰的珠蛋白：

i)将珠蛋白溶液与N,N'-二甲基-1,3-丙二胺(DMPA)或其类似物的pH中和溶液混合，并任选地将混合物的pH调节至5-7；

ii)随后或同时添加碳化二亚胺，例如N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)，并将所述混合物的pH调节pH至4-7；

iii)在0-25℃的温度和pH 4-7下搅拌(ii)中所述的混合物1-30小时；

iv)在pH 6.5-8.5的条件下，将(iii)中所述混合物中的蛋白与水或缓冲液分离至少4小时；

v)如有必要，将(iv)中所述混合物的pH调节至6.5-8.5。

16.如权利要求13或14所述的方法，其特征在于，所述电荷修饰的珠蛋白通过包含表达编码所述电荷修饰的珠蛋白的重组DNA序列的方法获得。