[发明专利]制备同种异体CAR T细胞的方法在审
| 申请号: | 202080031590.8 | 申请日: | 2020-04-24 |
| 公开(公告)号: | CN113748201A | 公开(公告)日: | 2021-12-03 |
| 发明(设计)人: | D·A·瓦加斯-因丘斯特吉;T·C·珀特尔;B·J·萨苏 | 申请(专利权)人: | 艾洛基治疗公司 |
| 主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/17 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李进;李唐 |
| 地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 制备 同种 异体 car 细胞 方法 | ||
1.一种用于T细胞扩增的细胞生长培养基,其包含:
细胞增殖的第一刺激剂和第二刺激剂,其各自独立地选自由以下组成的群组:IL-4、IL-7、IL-10、IL-12和IL-15;以及
细胞代谢的细胞外调节剂,其是浓度为约4mM到约40mM的细胞外钾,
其中所述第一刺激剂和所述第二刺激剂以约1000:1到约4:1的浓度比存在。
2.根据权利要求1所述的细胞生长培养基,其中所述细胞增殖的第一刺激剂是IL-7。
3.根据权利要求1或2所述的细胞生长培养基,其中所述细胞增殖的第二刺激剂是IL-15。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞生长培养基,其中所述第一刺激剂和所述第二刺激剂以约500:1到约10:1、约250:1到约10:1、约200:1到约10:1、约150:1到约10:1、约100:1到约10:1、约500:1到约50:1、约250:1到约50:1、约200:1到约50:1、约150:1到约50:1、约100:1到约50:1、约500:1到约75:1、约250:1到约75:1、约200:1到约75:1、约150:1到约75:1、约100:1到约75:1、约10:1到约4:1、约8:1到约4:1,或约7:1到约6:1的浓度比存在。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的细胞生长培养基,其中所述第一刺激剂和所述第二刺激剂以约150:1、约140:1、约130:1、约120:1、约110:1、约100:1、约90:1、约80:1,或约70:1的浓度比存在。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的细胞生长培养基,其中
第一刺激剂为IL-7,其以约100IU/mL到约5,000IU/mL的浓度存在;以及
第二刺激剂为IL-15,其以约1IU/mL到约100IU/mL的浓度存在。
7.根据权利要求6所述的细胞生长培养基,其中IL-7以约300IU/mL到约5000IU/mL的浓度存在,并且IL-15以约25IU/mL到约50IU/mL的浓度存在。
8.根据权利要求7所述的细胞生长培养基,其中IL-7以约5000IU/mL的浓度存在,并且IL-15以约50IU/mL的浓度存在。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的细胞生长培养基,其中细胞外钾以约20mM到约35mM或约20mM到约30mM的浓度存在。
10.根据权利要求9所述的细胞生长培养基,其中细胞外钾以约20mM或约25mM的浓度存在。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的细胞生长培养基,其中细胞外钾以KCl形式存在。
12.一种在体外获得T细胞群体的方法,所述方法包含用细胞生长培养基培养初始T细胞群体,所述细胞生长培养基包含
细胞增殖的第一刺激剂和第二刺激剂,其各自独立地选自由以下组成的群组:IL-4、IL-7、IL-10、IL-12和IL-15;以及
细胞代谢的细胞外调节剂,其是浓度为约4mM到约40mM的细胞外钾,
其中所述第一刺激剂和所述第二刺激剂以约1000:1到约4:1的浓度比存在。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述细胞生长培养基是根据权利要求1至11中任一项所述的细胞生长培养基。
14.根据权利要求12或13所述的方法,其中所获得的所述T细胞群体富集TCM和/或TSCM细胞。
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