[发明专利]用于帽柱木碱的免疫测定

说明书

提供或引入帽柱木碱的衍生物尤其是作为半抗原和免疫原的组合物、方法、测定和试剂盒。

相关申请的交叉引用

本申请要求在2019年10月24日提交的美国专利申请序列号16/662,408的申请的优先权，其要求在2019年3月26日提交的标题为IMMUNOASSAY FOR MITRAGYNINE(用于帽柱木碱的免疫测定)的美国临时专利申请序列号62/824,184的权益和优先权，以上申请通过引用以其全文并入本文。

背景

I.技术领域

本公开总体上涉及用于测量人类生物材料样品中、且尤其是流体样品中的帽柱木碱浓度的组合物、试剂盒和方法，所述流体样品包括口腔液、尿液、血清、血浆或全血。具体地，本公开涉及衍生自帽柱木碱并且可用于生产对帽柱木碱和/或帽柱木碱的代谢物特异的抗体的半抗原(hapten)(免疫原前体)和免疫原(immunogen)的制备和用途，以及用于测量帽柱木碱或帽柱木碱的代谢物的浓度的标记缀合物和免疫测定(immunoassay)，以及制造和使用它们的方法。

II.相关技术

帽柱木碱(mitragynine)(IUPAC名称：(E)-2-[(2S,3S,12bS)-3-乙基-8-甲氧基-1,2,3,4,6,7,12,12b-八氢吲哚并[2,3-a]喹嗪-2-基]-3-甲氧基丙-2-烯酸甲酯)是植物物种美丽帽柱木(Mitragyna speciosa，通常被称为“卡痛(kratom)”或“biak-biak”)的主要柯楠(corynanthe)型吲哚生物碱组分。尽管卡痛叶在一些国家有药用传统，但卡痛的娱乐用途和滥用导致了帽柱木碱成瘾和死亡的增加。近期娱乐性药物引起的精神刺激的增加，以及伴随而来的为达到这种效果而摄入的物质的种类和数量的增加，包括卡痛的使用。卡痛据称具有药用性质，并且尽管在某些国家是非法的，但它在英国以及欧洲和美国的大部分地区仍然是合法的，尽管它被美国缉毒局(U.S.Drug Enforcement Agency)列为关注物质并在某些州被禁止。

近期已有许多与其摄入相关的死亡报告，并且人们对于借助于帽柱木碱和卡痛的其他生物碱来检测卡痛以用于毒理学和研究目的的兴趣日益增加，所述卡痛的其他生物碱包括但不限于佩楠台因(paynantheine)、美艳帽柱木碱(speciogynine)、斯佩西亭(speciociliatine)、7-羟基-帽柱木碱(7-hydroxy-mitragine)。已描述的用于检测和定量帽柱木碱和其他卡痛生物碱的分析方法使用相对昂贵、依赖于专业操作员的高效液相色谱(HPLC)技术或与气相色谱(GC-MS)或液相色谱(LC-MS)联用的质谱技术(例如，Kaewklum,2005；Janchawee,2007；Le,2012)。由于在分析之前需要对样品进行预处理，这些技术可能是更复杂的。因此，在临床和司法鉴定上需要快速且经济地检测和定量患者样品和怀疑掺入卡痛的物质中的帽柱木碱及其代谢物。

用于检测和定量帽柱木碱的早期方法包括高效液相色谱(HPLC)，以及通过气相色谱(GC-MS)或液相色谱(LC-MS)进行分离后的质谱。

WO 2013/147586(Tan et al.)和US 9,952,206(Benchikh et al.)描述了用于检测和测量帽柱木碱和其他相关生物碱的免疫测定方法。具体地，Tan等人描述了合成帽柱木碱-对氨基苯甲酸(PABA-帽柱木碱)以生产用于产生抗体的免疫原的方法。Benchikh等人教导了8-去甲基帽柱木碱(8-desmethylmitragynine，也称为9-羟基柯楠碱(9-hydroxycorynantheidine))的衍生物用于生产与帽柱木碱、8-去甲基帽柱木碱、8-磺酰基帽柱木碱(8-sulphonylmitragynine)和/或8-葡萄糖醛酸苷基帽柱木碱(8-glucuronidylmitragynine)特异性结合的多克隆抗体。