[发明专利]新的乳酸细菌在审
| 申请号: | 202080021187.7 | 申请日: | 2020-03-13 |
| 公开(公告)号: | CN114072508A | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
| 发明(设计)人: | A·叶德烈约夫斯基;C·弗雷莫;S·范迪伦;T·德斯福格雷;M·C·若多;D·卢根 | 申请(专利权)人: | 杜邦营养生物科学有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/56 | 分类号: | C12N15/56;C12N9/38;C12N1/21;C12N15/74;C12P7/56;A23C9/12;C12R1/46 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 李波;初明明 |
| 地址: | 丹麦哥*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 乳酸 细菌 | ||
1.编码β-半乳糖苷酶FS的多核苷酸,其被定义为lacZ等位基因,所述lacZ等位基因将DGCC715衍生株中的通过测定法A在pH4.5下计算的LacS通透酶的乳糖输入的活性与通过测定法B在pH4.5下计算的β-半乳糖苷酶的乳糖水解的活性的比率(LacSpH4.5:LacZpH4.5比率)提高至大于8,所述DGCC715衍生株是菌株DGCC715(在2019年2月12日以访问号DSM33036保藏于DSMZ),在其中其lacZ基因被所述编码β-半乳糖苷酶FS的多核苷酸替换。
2.根据权利要求1所述的多核苷酸,其中所述LacSpH4.5:LacZpH4.5比率提高至大于10或大于12。
3.根据权利要求1或2所述的多核苷酸,其中通过测定法B在pH 6下在DGCC715-衍生株中计算的β-半乳糖苷酶的乳糖水解的活性(LacZpH6)为至少7.10-8 mol/(mg总蛋白提取物.min)。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的多核苷酸,其编码β-半乳糖苷酶FS,所述β-半乳糖苷酶FS相对于选自以下的β-半乳糖苷酶包含氨基酸抑制、氨基酸添加、氨基酸取代或氨基酸抑制和添加:
a) 具有如SEQ ID NO:2中所定义的氨基酸序列的β-半乳糖苷酶;和
b) 由lacZ变体等位基因编码的包含与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性的氨基酸序列的β-半乳糖苷酶变体,所述lacZ变体等位基因不将DGCC715-衍生株中的LacSpH4.5:LacZpH4.5比率提高至5或大于5,所述DGCC715衍生株是菌株DGCC715,在其中其lacZ基因被所述lacZ变体等位基因替换。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的多核苷酸,其中所述β-半乳糖苷酶FS的序列包含与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性的氨基酸序列或由与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性的氨基酸序列组成。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的多核苷酸,其中所述β-半乳糖苷酶FS的序列在位置354处不包含精氨酸,特别是在位置354处包含半胱氨酸或其等效氨基酸。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的多核苷酸,其中所述β-半乳糖苷酶FS的序列包含:
a) 氨基酸序列,其在其他方面如SEQ ID NO:2中所定义,但其在位置354处不包含精氨酸;
b) 氨基酸序列,其与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性并且在位置354处不包含精氨酸;
c) 氨基酸序列,其在其他方面如定义为与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性的β-半乳糖苷酶变体蛋白之一,但其在位置354处不包含精氨酸。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的多核苷酸,其中所述β-半乳糖苷酶FS的序列包含:
a) 氨基酸序列,其在其他方面如SEQ ID NO:2中所定义,但其在位置354处包含半胱氨酸或其等效氨基酸;
b) 氨基酸序列,其与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性并且在位置354处包含半胱氨酸或其等效氨基酸;
c) 氨基酸序列,其在其他方面如定义为与SEQ ID NO:2具有至少95%同一性的β-半乳糖苷酶变体蛋白之一,但其在位置354处包含半胱氨酸或其等效氨基酸。
9.包含根据权利要求5至8中任一项所述的多核苷酸的至少100个核苷酸的部分的多核苷酸,其中所述核苷酸部分涵盖对应于所述β-半乳糖苷酶FS的残基354的密码子。
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