[发明专利]细菌来源的囊泡及其用途

权利要求书

1.一种由革兰氏阴性细菌产生的非自然产生的人工外膜泡(aOMVs)组成的组合物，其中OMVs缺乏革兰氏阴性菌中存在的下列一种或多种成分:周质蛋白、内膜蛋白、核酸、细胞质蛋白和核糖体；和/或OMVs富含外膜蛋白。

2.权利要求1，其中aOMVs的直径为50nm-150nm。

3.权利要求1或2，其中革兰氏阴性细菌被转基因以减少脂多糖(LPS)的生产。

4.权利要求1-3，其中革兰氏阴性细菌经过基因修饰以增加至少一种内源性外膜蛋白的表达。

5.权利要求1-4，其中革兰氏阴性细菌被基因修饰以在外膜中表达至少一种异种蛋白。

6.权利要求5，其中所述至少一个异源蛋白包括癌症抗原。

7.权利要求5，其中至少一个异种蛋白包括来自不同革兰氏阴性细菌的外膜蛋白。

8.权利要求1-7，其中aOMVs是从第一种革兰氏阴性菌产生的，该组成进一步包括从第二种革兰氏阴性菌产生的aOMVs，其中第一和第二革兰氏阴性菌是不同的菌株、不同的物种或不同的属。

9.一种在哺乳动物实验对象中产生对革兰氏阴性菌的免疫反应的方法，该方法包括将权利要求1-8中的任何一种成分施加于实验对象，其数量能有效地诱导对哺乳动物实验对象中的革兰氏阴性菌的免疫反应。

10.权利要求9的方法，与自然产生的OMVs比较，上述输注产生减少的炎症反应。

11.权利要求10的方法，与自然产生的OMVs比较，其中减少的炎症反应包括较低水平的促炎细胞因子的产生。

12.权利要求10的方法，与自然产生的OMVs比较，其中减少的炎症反应包括较低水平的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和/或白介素-6(IL-6)的生产。

13.权利要求9的方法，与自然产生的OMVs比较，上述输注产生减少的毒性反应。

14.权利要求13的方法，其中减少的毒性反应包括白细胞数量的减少。

15.权利要求13的方法，其中减少的毒性反应包括血小板数量的减少。

16.权利要求13的方法，其中减少的毒性反应包括体重的减少。

17.权利要求9-16中的任何一种方法，其中免疫反应包括产生针对革兰氏阴性细菌的抗体。

18.其中任何一种方法要求9-17，其中免疫反应包括激活T细胞。

19.权利要求9-18中的任何一种方法，其中哺乳动物有发展败血症的风险，其中aOMVs是由导致败血症的大肠杆菌菌株产生的。

20.权利要求9-18中的任何一种方法，其中哺乳动物有发展肺炎的风险，其中aOMVs是由铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)产生的。

21.一个成分组成:由革兰氏阴性菌产生的人工外膜囊泡(aOMVs)，其中aOMVs缺乏革兰氏阴性菌中存在的一种或多种成分:内膜蛋白、核酸、胞浆蛋白和核糖体，和/或其中aOMVs在外膜蛋白中富集；和肿瘤囊泡，其中肿瘤囊泡包含至少一个肿瘤抗原。

22.权利要求21的组成部分，其中大肿瘤囊泡是直径为100nm-200nm的肿瘤囊泡。