[发明专利]基于锁闭的降解决定子的分子反馈回路及其使用方法

权利要求书

1.一种分子反馈回路，所述回路包含：

信号传导蛋白，当被信号传导途径的输入激活时，其驱动信号传导途径的输出，其中所述信号传导蛋白包含锁闭的降解决定子；和

响应所述输出并与编码钥匙多肽的核酸序列可操作地连接的调控序列，其中所述钥匙多肽在表达时，解锁该降解决定子，从而降解所述信号传导蛋白。

2.根据权利要求1所述的回路，其中所述锁闭的降解决定子包含：

降解决定子；

包含五个α螺旋的锁闭结构域；和

包含α螺旋的闩锁结构域，其中在所述钥匙多肽不存在的情况下，所述闩锁结构域与锁闭结构域形成六螺旋束，以锁闭所述降解决定子。

3.根据权利要求2所述的回路，其中所述钥匙包括α螺旋，所述α螺旋以比所述闩锁结构域更高的亲和力结合所述锁闭结构域。

4.根据权利要求2或3所述的回路，其中所述降解决定子被移植到所述闩锁结构域内。

5.根据权利要求2至4中任一项所述的回路，其中所述锁闭结构域和所述闩锁结构域的螺旋长度为30至50个残基。

6.根据权利要求3至5中任一项所述的回路，其中所述钥匙多肽的螺旋长度为40至60个残基。

7.根据权利要求2至6中任一项所述的回路，其中所述闩锁结构域包含立足点截短。

8.根据前述权利要求中任一项所述的回路，其中所述降解决定子包含不依赖于遍在蛋白的降解信号。

9.根据权利要求8所述的回路，其中所述不依赖于遍在蛋白的降解信号包含CA二肽基序。

10.根据权利要求9所述的回路，其中所述不依赖于遍在蛋白的降解信号包含LXMSCAQE基序，其中X是任意氨基酸。

11.根据权利要求10所述的回路，其中X是除脯氨酸外的任意氨基酸。

12.根据前述权利要求中任一项所述的回路，其中所述锁闭的降解决定子包括不对称的锁闭结构域。

13.根据前述权利要求中任一项所述的回路，其中所述锁闭的降解决定子与以下一个或多个的氨基酸序列共享至少70％的序列同一性：degronLOCKR_a_327、degronLOCKR_a_327_noPro、degronLOCKR_a_CAonly、degronLOCKR_a_324_t12、degronLOCKR_a_320_t16、degronLOCKR_b、degronLOCKR_b_t13、degronLOCKR_c、degronLOCKR_c_t13和degronLOCKR_d。

14.根据前述权利要求中任一项所述的回路，其中所述锁闭的降解决定子与以下的一个或多个共享至少90％的序列同一性：degronLOCKR_a_327、degronLOCKR_a_327_noPro、degronLOCKR_a_CAonly、degronLOCKR_a_324_t12和degronLOCKR_a_320_t16。

15.根据前述权利要求中任一项所述的回路，其中所述锁闭的降解决定子与以下的一个或多个共享至少90％的序列同一性：degronLOCKR_b和degronLOCKR_b_t13。

16.根据前述权利要求中任一项所述的回路，其中所述锁闭的降解决定子与以下的一个或多个共享至少90％的序列同一性：degronLOCKR_c和degronLOCKR_c_t13。