[发明专利]用于生产重组AAV的组合物和方法

权利要求书

1.核酸构建体，其包含编码腺相关病毒(AAV)VP1、VP2和VP3蛋白的核苷酸序列，其中相对于野生型VP1和VP2蛋白，所述VP1蛋白和所述VP2蛋白包含两个或更多个在残基157、162、164、179、188、194、196、197、200和201(根据SEQ ID NO:1编号)处的突变。

2.权利要求1的核酸构建体，其中所述VP1蛋白和所述VP2蛋白包含两个或更多个选自以下第一组的突变：S157A、T162S、Q164A、S179T、L188I、T194A、A196S、A197G、P200S和T201L。

3.权利要求2的核酸构建体，其中所述VP1蛋白和所述VP2蛋白包含所述第一组中的所有突变。

4.前述权利要求中任一项的核酸构建体，其中相对于野生型VP1蛋白，所述VP1蛋白进一步包含一个或多个在残基67、81、84、85和92(根据SEQ ID NO:1编号)处的突变。

5.权利要求4的核酸构建体，其中所述VP1蛋白包含一个或多个选自以下第二组的突变：A67E、Q81R、K84D、A85S和R92K。

6.权利要求5的核酸构建体，其中所述VP1蛋白包含所述第二组中的所有突变。

7.前述权利要求中任一项的核酸构建体，其中除所述突变外，所述VP1蛋白和所述VP2蛋白分别与野生型AAV6的VP1蛋白和VP2蛋白相同。

8.前述权利要求中任一项的核酸构建体，其中所述核苷酸序列还包含编码组装活化蛋白(AAP)的开放阅读框，其中相对于野生型AAP蛋白，所述AAP包含一个或多个在残基8、10、12、17、21和22(根据SEQ ID NO:10编号)处的突变。

9.权利要求8的核酸构建体，其中所述AAP包含一个或多个选自以下第三组的AAP突变：P8Q、H10L、L12Q、Q17P、L21Q和L22V。

10.权利要求9的核酸构建体，其中除所述AAP突变外，所述AAP与AAV6的野生型AAP相同。

11.权利要求10的核酸构建体，其中所述VP1蛋白和所述VP2蛋白衍生自AAV6且相对于AAV6 VP1和VP2蛋白，包含突变S157A、T162S、Q164A、S179T、L188I、T194A、A196S、A197G、P200S和T201L。

12.权利要求10的核酸构建体，其中所述构建体包含具有或不具有第一个氨基酸的SEQID NO:7的编码序列。

13.核酸构建体，其包含编码腺相关病毒(AAV)VP1、VP2和VP3蛋白的核苷酸序列，其中相对于野生型VP1蛋白，所述VP1蛋白包含一个或多个在残基81、84、85和92(根据SEQ IDNO:1编号)处的突变。

14.权利要求13的核酸构建体，其中所述VP1蛋白包含一个或多个选自下组的突变：Q81R、K84D、A85S和R92K。

15.权利要求14的核酸构建体，其中所述VP1蛋白包含所述组中的所有突变。

16.权利要求13至15中任一项的核酸构建体，其中所述VP1蛋白进一步包含在残基67处的突变。

17.权利要求16的核酸构建体，其中所述VP1蛋白包含A67E突变。

18.权利要求13至17中任一项的核酸构建体，其中除所述突变外，所述VP1蛋白与野生型AAV6的VP1蛋白相同。