[发明专利]用于生物样品中游离AIM的免疫分析方法及用于检测对象中NASH的方法

说明书

本发明要解决的问题是进一步提高与游离AIM特异性反应的抗体对游离AIM的特异性，已及不给患者和医务人员施加负担地诊断NASH。所述问题可以通过用于包含复合体AIM和游离AIM的生物样品中的游离AIM的免疫分析方法解决，该方法包括在抗‑IgM抗体存在下使生物样品和与游离AIM特异性反应的抗体接触。

技术领域

本发明涉及用于生物样品中的游离AIM的免疫分析方法和分析试剂盒。本发明还涉及用于抑制非特异性反应的方法，所述非特异性反应是在用于生物样品中的游离AIM的免疫分析方法中的非特异性反应。本发明还涉及用于检测对象中的NASH的方法和诊断试剂盒。

背景技术

AIM(巨噬细胞的凋亡抑制剂)是由组织巨噬细胞产生的、具有约50kDa分子量的分泌性血液蛋白。AIM具有下列结构，其中，具有包含许多半胱氨酸残基的特异性序列的3个富含半胱氨酸的清道夫受体(SRCR)结构域串联连接，并且认为半胱氨酸残基在各结构域中彼此二硫键结合以形成紧凑的球形三维结构。

已知AIM具有与各种分子诸如脂多糖、IgM、补体调节因子和脂肪酸合成酶结合的特征。特别地，已知AIM在血液中以与IgM的复合体的形式存在。由于IgM是超过500kDa的巨大的蛋白复合体，只要AIM结合到IgM，AIM则不通过肾小球和转移至尿中，并且保持AIM的高血液浓度。当从IgM解离时，AIM迅速被排泄至尿中。因此，大多数AIM在血液中与IgM形成复合体，并且与作为缀合物相比，在血液中极少以游离状态存在。

近年来，已阐明AIM牵涉各种疾病诸如胰岛素抵抗或动脉硬化中的病理状态的进展。例如，报告了以不结合于其它结合配偶的游离形式存在的游离AIM与肝疾病之间的关联(专利文献1)。

在肝疾病中，患有非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)的患者的数量近年来不断增加，并且据估计在日本约1500至2000万人患NAFLD。非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是非饮酒者发生脂肪肝的病理状态的总称。NAFLD分类为：非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)，其也是肝硬化和肝癌的发病机制；和病理状态几乎不进展的非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver，NAFL)。在日本，估计约150至300万人患NASH。

引用列表

专利文献

专利文献1：WO 2017/043617

发明概述

技术问题

当基于游离AIM量的测定结果诊断特定疾病时，需要排除形成复合体的AIM的量，测定仅游离AIM的量。但是，当检测游离AIM时，也可检测结合于其它结合配偶的复合体AIM。因此，对无复杂操作的、能够排除形成复合体的AIM的量，测定仅游离AIM的量的技术存在需求。

此外，对于NASH的确诊，肝组织活检是必不可少的，肝组织活检用于了解脂肪的量、炎症的程度和纤维化进展的程度，以能够诊断NASH。但是，肝组织活检牵涉用针刺入肝脏以采集部分组织或细胞，这给患者和医务人员施加过度的负担，并与并发症等的风险相关。因此，对可以更容易地进行并且不给患者和医务人员施加负担的新的NASH诊断方法的开发存在需求。

本发明的目的是提供具有优异特异性的、用于测定包含复合体AIM和游离AIM的生物样品中的游离AIM的量的免疫分析方法，以及具有优异特异性和灵敏的、用于检测对象中的NASH的方法。

解决问题的方案

[用于解决问题的方法]