[发明专利]结合PD-L1和OX40的双特异性抗体

权利要求书

1.一种结合OX40和PD-L1的双特异性抗体分子或其抗原结合片段，其由2条式(I)的多肽链和2条式(II)的多肽链组成：

(i)式(I)的多肽链：

VH-CH1-Fc-X-VHH；和

(ii)式(II)的多肽链：

VL-CL；

其中：

VH表示重链可变区；

CH表示重链恒定区；

Fc包含CH2、CH3，以及任选的CH4；

CH1、CH2、CH3和CH4分别表示重链恒定区的结构域1、2、3和4；

X表示柔性接头；

VHH表示单结构域抗原结合位点，其包含互补决定区域VHH CDR1、VHH CDR2和VHHCDR3，其中VHH CDR1由SEQ ID NO:10的氨基酸序列组成；VHH CDR2由SEQ ID NO:11的氨基酸序列组成；VHH CDR3由SEQ ID NO:12的氨基酸序列组成；

VL表示轻链可变区；

CL表示轻链恒定区；

任选地，CH1和Fc之间存在铰链区；

其中，式(I)中的VH-CH1-Fc包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列或由其组成；且

式(II)的VL-CL包含SEQ ID NO:7的氨基酸序列或由其组成；其中由VH和VL形成的抗原结合位点对OX40是特异性的，且由VHH形成的抗原结合位点对PD-L1是特异性的。

2.权利要求1的抗体分子或其抗原结合片段，其中所述接头包含氨基酸序列(Gly₄Ser)n，其中n是等于或大于1的正整数。

3.权利要求2的抗体分子或其抗原结合片段，其中所述n是1－7中的正整数。

4.权利要求3的抗体或其抗原结合片段，其中所述n是1、2，3，4，5或6。

5.权利要求1-4中任一项的抗体分子或其抗原结合片段，其中所述VHH选自骆驼科物种中天然存在的重链抗体的重链可变结构域或人源化的骆驼科抗体重链可变结构域。

6.权利要求1-4中任一项的抗体分子或其抗原结合片段，其中OX40为人OX40或猴OX40；和/或其中PD-L1为人PD-L1。

7.权利要求1-4中任一项的抗体分子或其抗原结合片段，其中式(I)中的VHH包含与SEQID NO:6的氨基酸序列具有至少95％同一性的氨基酸序列或由其组成。

8.权利要求7的抗体分子或其抗原结合片段，其中式(I)中的VHH包含SEQ ID NO:6所示的序列或由其组成。

9.权利要求1-4中任一项的抗体分子或其抗原结合片段，其中式(I)的多肽链包含与SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或由其组成。

10.权利要求9的抗体分子或其抗原结合片段，其中式(I)的多肽链包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或由其组成。

11.权利要求1-4、8或10中任一项的抗体分子或其抗原结合片段，其中式(II)的多肽链包含与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少90％同一性的氨基酸序列或由其组成。

12.权利要求1-4、8或10中任一项的抗体分子或其抗原结合片段，其中式(II)的多肽链包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列或由其组成。

13.分离的核酸，其编码权利要求1至12中任一项所述的抗体分子或其抗原结合片段。

14.包含权利要求13的核酸的表达载体。

15.权利要求14的表达载体，其中所述表达载体选自pXC载体或pTT5载体。