[发明专利]子宫内膜的miRNA容受性分析

说明书

本公开涉及一种使用来自女性的样本，例如子宫内膜检体来测定子宫内膜状态的方法，所述方法包括：(a)对来自女性的子宫内膜样本执行分析以测定子宫内膜样本的微小核糖核酸(miRNA)表达谱，其中miRNA表达谱包括多个miRNA，例如分别具有SEQ ID NO:1到SEQ ID NO:167的序列的167个miRNA的表达水平；和(b)使用例如计算机算法分析miRNA表达谱以获得容受性预测评分。本公开的另一方面涉及适合执行所述方法的试剂盒，以及使用试剂盒于诊断和治疗目的。

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年7月2日提交的美国临时专利申请第62/869,574号的权益，其全部内容以引用的方式并入本文中。

技术领域

本公开是有关于一种测定女性的子宫内膜容受性的方法，所述方法使用(a)包括多个miRNA，例如167个miRNA的表达水平的微小核糖核酸(miRNA)表达谱；和(b)计算机算法，所述计算机算法基于miRNA表达谱对女性的子宫内膜状态进行分类。本公开的另一方面是有关于适合执行所述方法的试剂盒，以及使用试剂盒于诊断和治疗目的。在一些实施例中，所述方法和/或试剂盒用于分类女性对体外受精(in vitro fertilization；IVF)疗程的反应性。

背景技术

辅助生殖技术(包含IVF)为具解决无法成功生殖的潜力方法。IVF能否成功的主要因素之一为子宫内膜的容受期状态。子宫内膜接受胚胎着床的时期仅开放相对短的时间，所述时期称为着床窗口期(window of implantation；WOI)。着床窗口期通常出现在大约月经周期的第19天到第21天。长期以来，着床窗口期大部分依赖日历方法计算可能的受孕时间，但此方法往往不可靠，因此需要直接透过检查子宫内膜本身以监测子宫内膜当下的状态，以更可靠的方式预测胚胎植入的机会点。

人类子宫内膜为通过蛋白质和miRNA两者周期性地调节的组织。人类基因组包括超过2500个miRNA，其中一些已被证实在生殖周期中具有调控作用。举例来说，最近的文献指出某些miRNA可以调控与着床窗口期发展过程有关的基因。

传统上，组织学和影像方法可用于评估子宫内膜的状态。然而，上述方法极为耗时，且通常无法清楚地区分子宫内膜的容受期状态与非容受期状态。市场上也陆续研发出利用特定基因表达水平检测的方法，早期研究多集中于特定的生物标记基因。艾捷隆(Igenomix)开发出“子宫内膜容受性分析”(Endometrial Receptivity Analysis；ERA)检测，其利用微阵列芯片分析与子宫内膜容受性有关的特定238个基因表达量。然而，基于微阵列芯片技术平台的ERA检测具有某些缺点。举例来说，众所周知以微阵列芯片分析基因表达量需要较多的组织样本。另外，相较于实时定量聚合酶连锁反应(quantitativepolymerase chain reaction；qPCR)技术，微阵列芯片技术平台通常具有较低的特异性。近期，ERA检测也推出以次世代定序(next-generation sequencing；NGS)技术平台进行子宫内膜容受性分析，然而该技术平台也同样需要较大量的检体组织及以及完整性佳的RNA样品质量进行分析。

综上所述，目前市面上仍需要一种更可靠的子宫内膜容受性检测方法，其可适用于较少量的检体组织或是低质量、低样品量样品，以判定子宫内膜处于容受期状态或非容受期状态。

发明内容

本公开涉及使用来自女性的样本，例如子宫内膜检体来测定子宫内膜容受性的方法，所述方法包括：(a)对来自女性的子宫内膜样本进行分析，以测定子宫内膜样本的miRNA表达谱，其中miRNA表达谱包括多个miRNA，例如分别具有SEQ ID NO:1到SEQ ID NO:167的序列的167个miRNA的表达水平；以及(b)分析miRNA表达谱以获得容受性预测评分，其中容受性预测评分用以判断女性的子宫内膜容受性状态。本公开的另一方面是有关于适合于执行所述方法的试剂盒，以及所述试剂盒用于测定女性的子宫内膜状态。