[发明专利]纳米线介导的传递系统和包括该系统的方法在审
| 申请号: | 202080001600.3 | 申请日: | 2020-06-29 |
| 公开(公告)号: | CN112585275A | 公开(公告)日: | 2021-03-30 |
| 发明(设计)人: | N·H·沃尔克;R·埃尔纳森;S·阿斯拉诺格鲁;Y·陈 | 申请(专利权)人: | 联邦科学技术研究组织;莫纳什大学 |
| 主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;B82Y5/00 |
| 代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 张晓威 |
| 地址: | 澳大利亚澳大*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 纳米 线介导 传递 系统 包括 方法 | ||
1.一种将分子传递到细胞中的方法,所述方法包括以下步骤:
a)获得NW阵列,其包括具有表面的衬底和附着到所述表面的多个纳米线(NW);
b)将包括分子和接头的混合物施加到所述NW上;
c)将所述NW与所述分子和所述接头一起孵育以形成官能化NW,其中所述分子通过所述接头附着到所述官能化NW;
d)将细胞添加到所述官能化NW上;
e)将所述细胞与所述官能化NW孵育以将所述分子传递到至少一些所述细胞中。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述接头选自硅烷、聚赖氨酸、可裂解接头、合成聚合物、等离子体聚合物、胶原、纤连蛋白和层粘连蛋白组成的组。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,其中,所述接头是聚赖氨酸。
4.根据权利要求3所述的方法,其中所述接头是聚-D-赖氨酸。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中,步骤c)包括将所述NW与所述分子和所述接头孵育约1至6h。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中,步骤c)包括将所述NW与所述分子和所述接头在约1至10℃的温度下孵育。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中,所述方法进一步包括在添加所述细胞之前除去在步骤c)中任何未结合的接头和/或未结合的分子的步骤。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,在加入所述细胞之前除去任何未结合的接头和/或未结合的分子之后干燥所述官能化NW。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中,所述方法还包括在所述孵育步骤e)期间离心所述细胞和官能化NW的步骤。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中,步骤e)包括将所述细胞与所述官能化NW孵育约6至12h。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法,其中,步骤e)包括将所述细胞与所述官能化NW在约30至40℃的温度下孵育。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,进一步包括在步骤e)之后从所述官能化NW分离所述细胞的步骤。
13.根据权利要求12所述的方法,进一步包括再培养所述分离的细胞的步骤。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法,其中,所述分子是核酸、蛋白、多糖或小分子。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法,其中,所述分子是DNA、RNA、反义或siRNA分子。
16.根据权利要求14或权利要求15所述的方法,其中,所述核酸是载体或质粒。
17.根据权利要求14至16中任一项所述的方法,其中,所述核酸编码嵌合抗原受体(CAR)。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法,其中,所述细胞是免疫细胞、无限增殖的细胞、神经元、成纤维细胞或干细胞。
19.根据权利要求18所述的方法,其中,所述免疫细胞是原代免疫细胞。
20.根据权利要求18或权利要求19所述的方法,其中,所述免疫细胞是T细胞。
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