[实用新型]一种鸡Wnt3a基因荧光定量RT-PCR试剂盒

说明书

本实用新型属于生物技术领域，具体公开了一种鸡Wnt3a基因荧光定量RT‑PCR试剂盒，包括盒体(4)，盒体(4)内设有DNA双链嵌合绿色染料热启动荧光PCR混合物(3)、鸡Wnt3a基因表达的特异性正反向引物(5)、定量PCR参比染料(6)、鸡内参基因β‑actin表达的特异性正反向引物(7)、灭菌无核酸酶水(8)。本实用新型主要用于鸡Wnt3a基因表达调控和皮肤毛囊发育相关的功能研究，试剂盒准确性高、快速、价格低廉。

技术领域

本实用新型属于生物技术领域，尤其涉及鸡Wnt3a基因表达荧光定量RT-PCR试剂盒，主要用于鸡Wnt3a基因表达调控和皮肤毛囊发育相关的功能研究。

背景技术

Wnt信号通路在动物的生长发育中扮演着多种关键角色，如神经系统发育、骨骼肌发育、皮肤毛囊的生长发育等。Wnt3a基因是Wnt信号通路的重要成员，被认为在毛囊的形态发生、发育、分布及生长周期中起着至关重要的作用。Wnt3a能够促进生黑色素细胞增殖和分化，在皮肤颜色变黑方面起重要的作用，同时在毛囊的不同的发育阶段起重要作用。肤色和毛囊密度的大小作为鸡的重要经济性状，是肉鸡产业关注的重要性状之一。研究Wnt3a基因的表达调控对于了解鸡皮肤毛囊的生长发育调控机理具有重要意义。

实用新型内容

为了解决以上技术问题，本实用新型提供一种鸡Wnt3a基因表达荧光定量RT-PCR检测试剂盒，本实用新型试剂盒准确性高、快速、价格低廉，通过本实用新型建立实时荧光定量 RT-PCR技术检测鸡Wnt3a基因表达的方法，为研究鸡Wnt3a表达调控以及皮肤毛囊生长发育调控奠定基础，为优质鸡育种提供理论依据，具有潜在的应用价值。

本实用新型的目的是通过以下技术方案实现的，鸡Wnt3a基因荧光定量RT-PCR试剂盒，包括盒体，盒体内设有DNA双链嵌合绿色染料(SYBR Green Master)热启动荧光PCR混合物、鸡Wnt3a基因表达的特异性正反向引物、鸡内参基因β-actin表达的特异性正反向引物、定量PCR参比染料(ROX)、灭菌无核酸酶水(DEPC)。

其中，鸡Wnt3a基因表达的特异性正反向引物为：

F:5，—ACTGAGAAGGACCTGGTTT—3，

R:5，—ATGGGAAGTGACGTTACAGA—3；

以及鸡内参基因β-actin表达的特异性正反向引物序列为:

F:5，—TGCTGTGTTCCCATCTATCG—3，

R:5,—TTGGTGACAATACCGTGTTCA—3。

优选的，试剂盒还包括盒盖，盒盖与盒体螺纹连接。

优选的，所述盒体内设有若干个容纳腔，容纳腔中对应设置DNA双链嵌合绿色染料(SYBR Green Master)热启动荧光PCR混合物、鸡Wnt3a基因表达的特异性正反向引物、定量PCR参比染料(Rox)、鸡内参基因β-actin表达的特异性正反向引物、灭菌无核酸酶水(DEPC)对应的试剂管；

所述容纳腔的内壁上设有定位槽组，包括第一定位槽、第二定位槽，第一定位槽沿容纳腔轴向设置，第二定位槽沿容纳腔周向设置，第一定位槽、第二定位槽相连通；试剂管上设有定位凸起，定位凸起分别与第一定位槽、第二定位槽相配合。

优选的，所述容纳腔的内壁上设有两个定位槽组，两个定位槽组呈中心对称结构；所述试剂管上设有2个定位凸起，2个定位凸起对称设置。

优选的，所述第一定位槽、第二定位槽组成L形结构。

上述鸡Wnt3a基因荧光定量RT-PCR试剂盒的使用方法如下：

(1)组织RNA的抽提与纯化：从鸡组织中提取总RNA并纯化；