[发明专利]一种获得工业大麻全雌性或全雄性种苗的方法

权利要求书

1.一种获得工业大麻全雌性或全雄性种苗的方法，其特征是：包括以下步骤：

(1)单性外植体的培养、获取

大麻开花季节，从健壮的雌性植株上选取顶端茎段，用消毒后的剪刀把顶部8-12cm的茎段剪切下来消毒；

(2)外植体材料灭菌

先用流水冲洗，再用新洁尔灭浸泡，洗净后剪成茎段后进行消毒处理：无菌水震荡冲洗，75％的酒精震荡冲洗，无菌水震荡冲洗2～5min，0.1％的氯化汞溶液，滴入2～5滴吐温80，震荡冲洗，无菌水震荡；

(3)灭菌后材料的培养

将消毒后的茎段用剪去伤口，将茎段剪成带有1-2个芽的茎段，接种于空白MS培养基中，接种完的外植体放置于培养间，进行培养；

(4)分化培养

将步骤3培养后带有幼芽的茎段，用手术剪剪去下端，然后插入到分化培养基中，分化培养基配方如下：MS+0.5～1.2mg·L^-16-BA+0.2～0.5mg·L^-1ZT+0.1～0.5mg·L^-1KT+25g·L^-1蔗糖+5g·L^-1琼脂粉(琼脂粉凝胶强度为1300g/cm²)；将接种后的幼苗放置于培养间培养；优选的：培养条件：温度25℃±1℃，湿度30％-50％，光照强度2500lx-4000lx，光照时间14h-16h，培养周期25-30d。

(5)继代扩繁培养

分化培养结束后，幼苗转接到继代培养基中进行继代扩繁培养；继代扩繁培养基为：

MS+0.2～1.0mg·L^-16-BA+0.3～1.5mg·L^-1IAA+0.1～0.5mg·L^-1ZT+0.1～0.2mg·L^-1KT+25g·L^-1蔗糖+5g·L^-1琼脂粉；

(6)生根培养

将4cm以上健壮的幼苗分成单棵，接到生根培养基中；生根培养基如下：WH+0.1～1.0mg·L^-1IAA+0.05～0.5mg·L^-1NAA+30g·L^-1蔗糖+5g·L^-1琼脂粉(琼脂粉凝胶强度为1300g/cm²)+0.2g·L^-1活性炭；

(7)温室驯化

当80％幼苗根长度大于3cm时，进行洗苗并定植到50孔的穴盘内，基质配比为草炭：珍珠岩：蛭石＝5-7：1-2：0.5-1，35天左右就可获得能定植到大田全雌或全雄工业大麻种苗。

2.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤(4)培养条件如下：温度25℃±1℃，湿度30％-50％，光照强度2500lx-4000lx，光照时间14h-16h；20-25d转瓶继续培养，直至分化出新芽。

3.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤(5)培养条件如下：培养条件：温度25℃±2℃，湿度30％-60％，光照强度2500lx-5000lx，光照时间14h-17h，培养周期25-35d。

4.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤(6)培养条件如下：温度25℃±2℃，湿度35％-60％，光照强度2500-4500lx，光照时间14-16h。培养25-35d，便可有根生出。

5.权利要求1-4任一所述的方法培育得到的工业大麻全雌性或全雄性种苗。

6.权利要求5所述的种苗在制备二氢大麻酚中的应用。