[发明专利]一种小鼠胰腺类器官培养基及其应用有效
| 申请号: | 202011633176.2 | 申请日: | 2020-12-31 |
| 公开(公告)号: | CN112592883B | 公开(公告)日: | 2021-08-31 |
| 发明(设计)人: | 徐丛;朱宇;于言;黄敏 | 申请(专利权)人: | 创芯国际生物科技(广州)有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
| 代理公司: | 广州容大知识产权代理事务所(普通合伙) 44326 | 代理人: | 刘新年 |
| 地址: | 510600 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 小鼠 胰腺 器官 培养基 及其 应用 | ||
1.一种小鼠胰腺类器官培养基,其特征在于:包括基础培养基和特异性添加因子;所述基础培养基为DMEM/F12(1:1)减血清培养基;所述特异性添加因子采用以下终浓度的组分:不含维生素A的B27,1-3×;N-acetylcysteine,1-10mM;L-WRN细胞上清液,10%~30%;小鼠IGF 100-200 ng/ml;小鼠EGF,10-50 ng/ml;Y27632,10-30μM;Nicotinamide,10-20 mM;SAR407899,5-10μM;维生素B3,5-10 mM;氢化可的松,2-6uM;Primocin,100-200ug/ml;硫酸庆大霉素10-50µg/mL;前述的百分浓度表示体积浓度。
2.一种小鼠胰腺类器官的培养方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)将小鼠胰腺进行预处理后消化并过滤,得到细胞团;
2)采用权利要求1所述的培养基重悬所述细胞团,然后与matrigel胶混匀并接种,待混合胶凝固后加入权利要求1所述的培养基,并于37℃、5% CO2浓度下培养3-10天,即得。
3.根据权利要求2所述的一种小鼠胰腺类器官的培养方法,其特征在于:所述细胞团的直径为15~100μm。
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