[发明专利]一种基于CRISPR/Cas12a系统的生物检测方法和生物检测装置

权利要求书

1.一种基于CRISPR/Cas12a系统的生物检测方法，包括以下步骤：

将待测样品与捕获试剂混合孵育、退火，得到退火产物；

所述退火产物进行链置换扩增，得到链置换扩增产物；

使用所述链置换扩增产物激活CRISPR/Cas12a系统；

使用生物传感器检测激活的CRISPR/Cas12a系统；

其中，所述生物传感器的电极表面修饰有纳米枝晶，

其中，所述纳米枝晶表面修饰有电化学探针。

2.根据权利要求1所述的生物检测方法，其特征在于，所述电极为金电极。

3.根据权利要求1所述的生物检测方法，其特征在于，所述纳米枝晶为金纳米枝晶。

4.根据权利要求1所述的生物检测方法，其特征在于，所述金纳米枝晶表面修饰有二茂铁标记的寡核苷酸链。

5.根据权利要求1所述的生物检测方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas12a系统包括CRISPR/Cas12a蛋白和crRNA。

6.根据权利要求1-5任一项所述的生物检测方法，其特征在于，检测靶标为核酸，优选地，所述检测靶标为miRNA。

7.根据权利要求6所述的生物检测方法，其特征在于，所述捕获试剂中包括第一类捕获探针，所述第一类捕获探针为单链DNA，所述第一类捕获探针中包括序列A和序列B，所述序列A用于特异性结合所述核酸，所述序列B为所述链置换扩增的模板，所述序列A和所述序列B之间含有限制性内切酶特异性识别位点。

8.根据权利要求1-5任一项所述的生物检测方法，其特征在于，检测靶标为小分子化合物，优选地，所述检测靶标为赭曲霉毒素、黄曲霉毒素或腺嘌呤核苷三磷酸。

9.根据权利要求8所述的生物检测方法，其特征在于，所述捕获试剂中包括修饰有生物素的适配体、包被有链霉亲和素的磁珠、Trigger-DNA、和第二类捕获探针，

所述修饰有生物素的适配体可与检测靶标特异性结合，

所述修饰有生物素的适配体与所述Trigger-DNA部分序列互补，

所述第二类捕获探针为单链DNA，所述第二类捕获探针中包括序列A’和序列B’，所述序列A’用于特异性结合所述Trigger-DNA，所述序列B’为所述链置换扩增的模板，所述序列A’和所述序列B’之间含有限制性内切酶特异性识别位点。

10.一种生物检测装置，其特征在于，包括信号捕获元件、转换元件和信号检测元件，其中信号捕获元件包括捕获试剂，所述转换元件包括CRISPR/Cas12a系统，所述信号检测元件包括电极表面修饰有纳米枝晶，所述纳米枝晶表面修饰有电化学探针的生物传感器。