[发明专利]一种适用于葛仙米营养生长的改良培养基及配制方法

权利要求书

1.一种适用于葛仙米营养生长的改良培养基的配制方法，其特征在于，包括以下步骤：先分别配制A溶液母液、B溶液母液、C溶液母液、D溶液母液、E溶液母液和F溶液母液，A溶液母液、B溶液母液、C溶液母液、D溶液母液、E溶液母液和F溶液母液分别保存；使用时，依次将A溶液母液、B溶液母液、C溶液母液、D溶液母液、E溶液母液和F溶液母液溶于溶剂中，调节pH后，调节pH后，在121℃，0.1Mpa条件下灭菌20min，待培养基温度降到室温后，即可接种葛仙米的藻种；其特征在于，所述的配制方法具体包括以下步骤：

（1）配制A溶液母液：称取25.0g硝酸钠溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取0.800g磷酸氢二钾溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取1.50g七水合硫酸镁溶于少量溶剂中使之完全溶解；将溶解的硝酸钠溶液、磷酸氢二钾溶液和七水合硫酸镁溶液混合均匀，用溶剂定容至1 L配成A液母液，使硝酸钾浓度为25.0g/L，磷酸氢二钾浓度为0.800g/L，七水合硫酸镁浓度为1.50g/L；

（2）配制B溶液母液：称取3.00g柠檬酸溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取3.00g柠檬酸铁铵溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取0.500g乙二胺四乙酸二钠溶于少量溶剂中使之完全溶解；将溶解的柠檬酸溶液、柠檬酸铁铵溶液和乙二胺四乙酸二钠溶液混合均匀，用溶剂定容至1 L配成B液母液，使柠檬酸浓度为3.00g/L，柠檬酸铁铵浓度为3.00g/L和乙二胺四乙酸二钠浓度为0.500g/L；

（3）配制C溶液母液：称取13.6 g无水氯化钙溶于少量溶剂中使之完全溶解，用溶剂定容至1 L配成C液母液，使氯化钙浓度为 13.6 g/L；

（4）配制D溶液母液：称取20.0g碳酸钠溶于少量溶剂中使之完全溶解，用溶剂定容至1L配成D液母液，使碳酸钠浓度为20.0g/L；

（5）配制E溶液母液：称取2.86g硼酸溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取1.81g四水合氯化锰溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取0.220g七水合硫酸锌溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取0.390g钼酸钠溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取0.0800mg五水合硫酸铜溶于少量溶剂中使之完全溶解；称取0.0400mg六水合氯化钴溶于少量溶剂中使之完全溶解；将溶解的硼酸溶液、四水合氯化锰溶液、七水合硫酸锌溶液、钼酸钠溶液、五水合硫酸铜溶液和六水合氯化钴溶液混合在一起，用溶剂定容至1 L配成E溶液母液，使硼酸浓度为2.86g/L，四水合氯化锰浓度为1.81g/L，七水合硫酸锌浓度为0.220g/L，钼酸钠浓度为0.390g，五水合硫酸铜浓度为0.0800g/L和六水合氯化钴浓度为0.0400g/L；

（6）配制F溶液母液：称取1000g土壤加溶剂1000mL搅拌，用滤纸滤过得到土壤浸出液，再用溶剂定容至1L；

（7）使用时，取40.0 mL A溶液母液、1.50mL B溶液母液、1.50mL C溶液母液、0.800mL D溶液母液，0.800mL E溶液母液和500mL F溶液母液，最后用溶剂定容至1 L；使A液使硝酸钾浓度为25.0g/L，磷酸氢二钾浓度为0.800g/L，七水合硫酸镁浓度为1.50g/L，B液柠檬酸浓度为3.00g/L，柠檬酸铁铵浓度为3.00g/L和乙二胺四乙酸二钠浓度为0.500g/L，C液氯化钙浓度为 13.6 g/L，D液碳酸钠浓度为20.0g/L，E液硼酸浓度为2.86g/L，四水合氯化锰浓度为1.81g/L，七水合硫酸锌浓度为0.220g/L，钼酸钠浓度为0.390g，五水合硫酸铜浓度为0.0800g/L和六水合氯化钴浓度为0.0400g/L；用NaOH或HCl调节pH值到7.1，在121℃，0.1Mpa条件下灭菌20min，待培养基温度降到室温后，然后用于接种所需培养的葛仙米藻种。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述A溶液母液、B溶液母液、C溶液母液、D溶液母液、E溶液母液和F溶液母液分别于4℃、避光条件下保存。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的溶剂为普通蒸馏水。

4.一种按照权利要求1-3任一项所述的配制方法配制而成的改良培养基。

5.一种权利要求4所述的改良培养基的应用，其特征在于，所述的改良培养基用于葛仙米营养生长阶段。

6.一种权利要求4所述的改良培养基的应用，其特征在于，所述的改良培养基用于普通葛仙米或翡翠绿葛仙米的规模化培养。