[发明专利]一种利用自立自封薄膜袋进行开放式植物组培快繁的方法

权利要求书

1.一种利用自立自封薄膜袋进行开放式植物组培快繁的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

选用自立自封薄膜袋和制作杀菌培养基；

将所述杀菌培养基加入到所述自立自封薄膜袋中，非密封放在桌面上进行冷凝；

冷凝后在非无菌环境条件下进行开放式操作接种；

接种完毕按压所述自立自封薄膜袋的自封条进行密封；

最后将接种完并密封的自立自封薄膜袋放培养架上整齐摆放进行培养。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述自立自封薄膜袋的壁厚为0.06mm～0.09mm，透光率为95～100％。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述自立自封薄膜袋的规格为袋宽10cm，袋高15cm，底部高3cm，或者袋宽12cm，袋高17cm，底部高4cm，或者袋宽13cm，袋高18cm，底部高4cm，或者袋宽15cm，袋高20cm，底部高4cm。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述自立自封薄膜袋是由聚对苯二甲酸乙二酯和聚丙烯复合材料制作而成。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述杀菌培养基由生长培养基和杀菌剂配制而成，所述杀菌剂的添加浓度为0.3ml/L。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述杀菌剂为植物组织培养高效抗污杀菌剂S106。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述接种的具体方法如下：用手指轻轻拉开袋口，用一枚不锈钢小夹子，垂直于开口面夹住，自立自封薄膜袋袋口即张开；

把自立自封薄膜袋母苗袋口用手提喷雾器喷75％酒精消毒后，放在桌面上，用手扯开母苗袋口，用另一个不锈钢小夹垂直于开口面夹住，母苗袋口张开；把干净的医用手术剪、镊子浸泡于装有75％酒精的广口瓶中用消毒，从广口瓶中取出消毒后的医用手术剪和镊子，从母苗袋中夹取母苗，修剪好后放入待接种自立自封薄膜袋中，取下夹子，母苗袋口非密封自然闭合；以同样的方法直至母苗袋中母苗剪完；

左手按压待接种自立自封薄膜袋袋口自然张口，右手从消毒酒精瓶中取出镊子，在袋中把植物茎段按生物极性方向均匀插入杀菌培养基表面，按压待接种自立自封薄膜袋自封条密封，接种完毕。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

釆用聚对苯二甲酸乙二酯和聚丙烯复合材料制造出壁厚为0.06mm，透光率95～100％，规格袋宽13cm，袋高18cm，底部高4cm的自立自封薄膜袋，作为植物组培快繁容器；

先在电饭锅内加入1升水烧到80℃时，依次加入蔗糖30g、琼脂4g进行溶化；再加入100倍MS母液、1mg/ml浓度的6-BA0.3ml、1mg/ml浓度的IBA0.1ml，煮沸，调pH值为5.8，得到生长培养基；然后加入杀菌剂0.3ml，煮沸1～2分钟，使之与生长培养基混合均匀，制备得到杀菌培养基；

扯开自立自封薄膜袋的自封条，倒入制备的杀菌培养基45ml，袋底即自行张开可以自立，袋口自然轻微闭合，待杀菌培养基凝固即可接种；

用手指轻轻拉开袋口，用一枚不锈钢小夹子，垂直于开口面夹住，培养袋口即张开；把培养袋母苗袋口用手提喷雾器喷75％酒精消毒后，放在桌面上，用手扯开母苗袋口，用另一个不锈钢小夹垂直于开口面夹住，母苗袋口张开；把干净的医用手术剪、镊子浸泡于装有75％的酒精的广口瓶中进行消毒，消毒完后从广口瓶中取出医用手术剪和镊子，从母苗袋中夹取菊花苗，剪去叶片、根系，每二叶节为一段，剪下放入待接种新培养袋中，每袋放6～8段，取下夹子，袋口非密封自然闭合；以同样的方法直至母苗袋中菊花苗剪完；

左手按压袋口自然张口，右手从消毒酒精瓶中取出镊子，在袋中把6～8个菊花茎段按生物极性方向均匀插入培养基表面，按压自立自封薄膜袋封条密封，接种完毕；

把接种完密封好的自立自封薄膜袋均匀摆放在培养室的培养架上进行培养；培养30天后再重复转接操作，使菊花苗越来越多。