[发明专利]用于促肾上腺皮质激素检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法

说明书

本发明涉及电化学检测领域，特别涉及用于促肾上腺皮质激素(ACTH)检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法。本发明采用方法为电化学发光法，采用吡啶钌作为化学发光标记物具有明显优势，主要表现在：灵敏度更好，稳定性更好，钌是金属离子，分子量小，不影响抗体的空间位阻。生产过程短，重复性好，检测范围宽。电化学发光反应可控，降低信号采集难度。

技术领域

本发明涉及电化学检测领域，特别涉及用于促肾上腺皮质激素(ACTH) 检测的组合物，该组合物的应用，一种磁微球电化学发光免疫检测试剂盒，以及一种磁微球电化学发光免疫检测方法。

背景技术

测定ACTH并结合其它实验室检测指标及临床调查结果有助于辅助诊断和治疗患者肾上腺皮质功能失常及下丘脑-垂体-肾上腺系统病变的诊断。

促肾上腺皮质激素或促皮激素(ACTH)是垂体前叶分泌的一种由39个氨基酸组成的多肽。它可刺激肾上腺皮质分泌氢化可的松等糖皮质激素，并对肾上腺皮质所分泌的另一种主要类固醇激素——醛固酮的分泌水平进行一定的控制。

涉及糖皮质激素的流行病是继发性库欣氏综合征或肾上腺皮质功能亢进，该病引起ACTH水平增高。引起ACTH水平增高的另一病症是纳尔逊综合征；这是一种十分罕见的综合征，出现于15-25％的因库欣氏病而接受肾上腺摘除的患者中。ACTH水平也可受到肾上腺机能不全(肾上腺皮质功能减退)的影响。在这些情况下，氢化可的松测定本身不足以将肾上腺机能不全 (因艾迪生氏病而引起)的原发性病因和继发性病因区分开来。

到目前为止，用于检测人体EDTA血浆样本中促肾上腺皮质激素(ACTH) 的含量的方法主要有：酶联免疫法(ELISA)和酶促磁微粒化学发光；本发明采用方法为电化学发光法，采用吡啶钌作为化学发光标记物具有明显优势，主要表现在：灵敏度更好，钌是金属离子，分子量小，不影响抗体的空间位阻。生产过程短，稳定性好。检测范围宽，重复性好。电化学发光反应可控，降低信号采集难度。

发明内容

本发明提供了一种用于促肾上腺皮质激素(ACTH)检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法，具有生产效率高、检测时间短、适用于全自动检测，具有更高的灵敏度、线性范围宽等优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了用于促肾上腺皮质激素(ACTH)检测的组合物，包括ACTH 试剂Ra、ACTH试剂Rb、链霉亲和素超顺磁微球；

所述ACTH试剂Ra包括含生物素标记的抗ACTH单克隆抗体；

所述ACTH试剂Rb包括含三联吡啶钌标记的抗ACTH单克隆抗体；

所述链霉亲和素超顺磁微球包括表面包裹带有链霉亲和素的超顺磁微球。

在本发明的一些具体实施方案中，所述磁微球的粒径在1.5～5.0μm。

在本发明的一些具体实施方案中，所述ACTH试剂Ra中，每个抗体分子表面的生物素分子标记量为2～5个；所述ACTH试剂Rb中，每个抗体分子表面的钌分子标记量为2～10个。

在本发明的一些具体实施方案中，所述ACTH试剂Ra的制备方法为：在缓冲液存在的条件下，取抗ACTH单克隆抗体与生物素混合，制得所述ACTH 试剂Ra；所述缓冲液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸盐缓冲液或 pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。