[发明专利]一种Tirzepatide的纯化方法有效
| 申请号： | 202011612943.1 | 申请日： | 2020-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN112661815B | 公开（公告）日： | 2022-12-27 |
| 发明（设计）人： | 谷海涛;黄志强 | 申请（专利权）人： | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C07K1/14;C07K1/22 |
| 代理公司： | 连云港润知专利代理事务所 32255 | 代理人： | 刘喜莲 |
| 地址： | 222000 江苏省连云*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 tirzepatide 纯化 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种Tirzepatide的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤1：取Tirzepatide粗肽溶于纯化水中，用用氨水调pH8.0至完全溶解，溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤，获得粗肽溶液；
步骤2：取所述粗肽溶液，经八烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行第一次纯化，以A1溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，得第一次纯化物；
步骤3：取所述第一次纯化物，经八烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行第二次纯化，以A2溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分,得第二次纯化物；
步骤4：取所述第二次纯化物经减压旋蒸浓缩、冷冻干燥，得到Tirzepatide成品，所述A1溶液为0.1%-0.2%氨水水溶液，高氯酸调pH=2.0-3.0；
所述A2溶液为10mmol/L-15mmol/L氯化钠水溶液，氢氧化钠调pH=7.5-8.5；
所述B溶液为100%乙腈；
步骤2中所述A1溶液与所述B溶液的体积分数比为72％:28％→53％:47％，梯度洗脱时间为50min-60min；
步骤3中所述A2溶液与所述B溶液的体积分数比为67％:33％→47％:53％，梯度洗脱时间为50min-60min；
步骤2和步骤3中所述第一次纯化和第二次纯化的流速为50mＬ/min。
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