[发明专利]一种H9N2禽流感病毒、灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明提供一种H9N2禽流感病毒、灭活疫苗及其制备方法，属于生物工程领域。H9N2禽流感病毒AH05株，其保藏登记号为：CGMCC No.19386。本发明还提供H9N2禽流感病毒AH05株疫苗的制备方法，包括如下步骤：将AH05株病毒液灭活；将注射用白油和司本‑80混合均匀，作为油相溶液；将灭活的AH05株病毒液和吐温‑80混合均匀，作为水相溶液；将油相溶液和水相溶液混合，乳化，即获得所述灭活疫苗。本发明还提供含有H9N2禽流感病毒AH05株的新城疫、禽流感和禽腺病毒三联灭活苗。本发明H9N2禽流感病毒AH05株是2019年5月分离、鉴定的新的流行毒株，免疫原性强、交叉保护性好，用其制备成禽流感灭活疫苗，该疫苗安全性高、产生抗体早、抗体高并且免疫持续期长，免疫该疫苗能很好地控制H9N2禽流感疾病的发生与流行。

技术领域

本发明涉及一种H9N2禽流感病毒及用其制备的灭活疫苗的效力评价，属于生物工程领域。

背景技术

禽流感病毒属于甲型流感病毒，隶属于正粘病毒科A型流感病毒属，因为该病毒是负链、分节段的RNA病毒，所以很容易发生变异并不断突破其感染宿主的种属障碍，引起新的流感流行。禽流感病毒的基因组为分节段的单股负链RNA，分为不同的亚型，HA已发现16个亚型，为H1～H16，NA有9个亚型，为N1～N9。H9N2亚型禽流感在全世界范围的禽群中广泛存在。H9N2亚型禽流感虽然发病率高但是死亡率低，容易导致严重的免疫抑制，易继发大肠杆菌或其他病原的感染，给养禽业造成严重的经济损失，而且对人类健康也构成了威胁。应用相应血清型的疫苗进行免疫接种是对低致病性禽流感所采取的切实可行的方法。但是，由于目前市场上所应用的H9N2亚型禽流感疫苗毒株大多是10多年前分离的，而流感病毒易发生变异，经常出现新的流行毒株，所以分离时间比较早的疫苗株不能保护新近流行毒株攻毒。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种免疫原性强、交叉保护性好的H9N2禽流感病毒AH05株。

本发明的再一目的是提供含有所述H9N2禽流感病毒AH05株的疫苗，该毒株是2019年5月分离、鉴定的新的流行毒株，用其制备成禽流感灭活疫苗，该疫苗安全性高、产生抗体早、抗体高并且免疫持续期长，免疫该疫苗能很好地控制H9N2禽流感疾病的发生与流行。

本发明的另一目的是提供含有所述H9N2禽流感病毒AH05株的新城疫、禽流感和禽腺病毒三联灭活苗。

本发明的目的采用以下技术方案实现：

H9N2禽流感病毒AH05株，其保藏登记号为：CGMCC No.19386。

H9N2禽流感病毒AH05株病毒液的制备方法：采用鸡胚增殖H9N2禽流感病毒AH05株，取鸡胚液即得病毒液。

本发明还提供含有所述H9N2禽流感病毒AH05株的疫苗。

优选的技术方案中，所述疫苗为灭活疫苗。

本发明还提供所述疫苗的制备方法，包括如下步骤：

(1)将H9N2禽流感病毒AH05株病毒液灭活；

(2)将注射用白油和司本-80混合均匀，作为油相溶液；

(3)将灭活的H9N2禽流感病毒AH05株病毒液和吐温-80混合均匀，作为水相溶液；

(4)乳化：将油相溶液和水相溶液混合，乳化，即获得所述H9N2禽流感病毒AH05株灭活疫苗。

优选的技术方案中，步骤(1)中采用甲醛灭活H9N2禽流感病毒AH05株病毒液。

优选的技术方案中，注射用白油和司本-80的体积比为94:6，灭活的H9N2禽流感病毒AH05株病毒液和吐温-80的体积比为96:4，油相溶液和水相溶液的体积比为3:1。