[发明专利]一种无患子三萜类皂苷成分的指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种无患子三萜类皂苷成分的指纹图谱检测方法，包括步骤：1)制备参照物溶液和含无患子皂苷的供试品溶液；2)基于步骤1)的各溶液，采用高效液相色谱法得到参照物溶液和含无患子皂苷的供试品溶液的指纹色谱图；3)基于步骤2)的指纹色谱图生成无患子三萜类皂苷成分的对照指纹图谱，选择成分较高且分离度较好的色谱峰为特征峰，并确定为共有峰；4)将待测无患子果皮、无患子皂苷提取物原料的指纹色谱图与步骤3)的对照指纹图谱进行比较，相似度不低于0.90则判定为符合规定，相似度小于0.90则判定为不符合规定。该方法操作简便、稳定性高、重现性好，能全面反映皂苷成分信息，适用于无患子果皮及无患子皂苷提取物原料的质量控制。

技术领域

本发明涉及一种无患子三萜类皂苷成分的指纹图谱检测方法，属于生物检测技术领域。

背景技术

无患子来源无患子科(Sapindaceae)，俗称“菩提树、皂果、肥皂树”等，拉丁学名Sapindus，意即“印度肥皂”。《本草纲目》记载，无患子果实可用于洗发洗面，因其果皮含有丰富的皂苷，其中大部分为三萜类皂苷，即无患子皂苷，总含量约为5.33％。无患子皂苷为天然的非离子型表面活性剂，临界胶束浓度和表面张力均较低，能显著降低水的表面张力，泡沫丰富，手感细腻，去污力强，能100％降解，长期使用不会对人体和环境有害，愈来愈广泛应用于日化行业中，特别是洗涤用品和化妆品中。目前国内市场上已有添加了无患子皂苷的化妆品、洗涤用品出售，例如迪奥、高斯、仙美无患等。

目前，文献报道的无患子皂苷检测方法有高效液相色谱法指纹图谱鉴别，比色法、高效液相色谱法、近红外法含量测定等，但现有的指纹图谱鉴别为无患子皂苷水解产物的指纹图谱，含量测定为无患子皂苷水解产物常春藤皂苷元的含量，由于皂苷元无表面活性，不能反映原料中表面活性成分无患子三萜皂苷成分分布及含量多少，因此现有方法不能准确有效地评价其质量。实验表明，采购的部分批次无患子皂苷提取物原料表面活性、起泡性与标签标示的无患子皂苷含量并不呈正相关，有的批次按现有方法检测其皂苷含量测定值很高，但其表面活性、起泡性很差，提示目前市场上无患子皂苷提取物原料质量良莠不齐，现有方法不能有效控制其质量。针对现有技术的不足，有必要建立无患子果皮及无患子皂苷提取物原料三萜类皂苷成分的指纹图谱方法，以更全面反映皂苷成分信息，更有效控制果皮及无患子皂苷提取物原料质量。

发明内容

针对以上技术问题，本发明提供一种无患子三萜类皂苷成分的指纹图谱检测方法，该方法包括以下步骤：

1)制备参照物溶液和含无患子皂苷的供试品溶液；

2)基于步骤1)中制备的各溶液，采用高效液相色谱法得到参照物溶液和含无患子皂苷的供试品溶液的指纹色谱图；

3)基于步骤2)中获得的指纹色谱图生成无患子三萜类皂苷成分的对照指纹图谱，选择其中主要成分较高且分离度较好的色谱峰作为特征峰，并确定为共有峰；

4)将待测无患子果皮、无患子皂苷提取物原料的指纹色谱图与步骤3)的对照指纹图谱进行比较，相似度不低于0.90则判定为符合规定，相似度小于0.90则判定为不符合规定。

进一步的，上述步骤1)中的含无患子皂苷的供试品溶液采用的是无患子果皮供试品溶液和无患子皂苷提取物原料供试品溶液。

进一步的，上述无患子果皮供试品溶液的制备包括以下步骤：取无患子果皮，干燥，粉碎成细粉，称取0.5-1.5g，加入6-70mL的甲醇、乙醇或水，超声提取15-45min，冷却定容至10-100mL量瓶，用滤膜过滤，取续滤液即得。

进一步的，上述无患子皂苷提取物原料供试品溶液的制备包括以下步骤：取无患子皂苷提取物原料0.05-0.2g，加入6-70mL的甲醇或乙醇，超声提取5-15min，冷却定容至10-100mL量瓶，用滤膜过滤，取续滤液即得。