[发明专利]靶向CAFs的肿瘤细胞疫苗、其制备方法及其应用有效
| 申请号： | 202011608143.2 | 申请日： | 2020-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN112603995B | 公开（公告）日： | 2022-03-18 |
| 发明（设计）人： | 陈梅华;郎锦义;谢继锐 | 申请（专利权）人： | 四川省肿瘤医院 |
| 主分类号： | A61K39/00 | 分类号： | A61K39/00;A61K39/39;A61K41/00;C12N5/10;C12N15/867;A61P35/00 |
| 代理公司： | 北京市领专知识产权代理有限公司 11590 | 代理人： | 张玲;王莹莹 |
| 地址： | 610042 四川*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 靶向 cafs 肿瘤 细胞 疫苗 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种靶向CAFs的肿瘤细胞疫苗的制备方法，其特征在于：采用慢病毒包装质粒感染肿瘤细胞得到稳定表达株，然后灭活制得，具体包括以下步骤：
（1）以FAP cDNA为模板进行PCR扩增，得到PCR扩增片段；
（2）将步骤（1）所得的PCR扩增片段通过无缝克隆连接于经EcoRI和BamHI酶切的慢病毒载体pCDH，构建携带FAP的慢病毒载体pCDH-FAP；
（3）通过EcoRI和BamHI酶切pCDH-FAP，将pCDH-FAP进行测序验证；
（4）将pCDH-FAP与慢病毒辅助质粒通过磷酸钙共同转染293T细胞，进行慢病毒包装lenti-FAP；
（5）将步骤（4）包装成功的慢病毒lenti-pCDH和lenti-FAP分别感染肿瘤细胞，得到稳
定表达株；
（6）将步骤（5）所述的稳定表达株进行辐照灭活，即得。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述的慢病毒辅助质粒为psPAX2和pMD2G。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（5）所述的肿瘤细胞为LLC、4T1和CT26细胞中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤（6）所述的辐照为100Gy的放射线。
5.权利要求1-4任意一项的制备方法所制得的靶向CAFs的肿瘤细胞疫苗。
6.权利要求1-4任意一项的制备方法所制得的靶向CAFs的肿瘤细胞疫苗在制备用于上皮来源的肿瘤的药物中的应用。
7.权利要求1-4任意一项的制备方法所制得的靶向CAFs的肿瘤细胞疫苗在制备用于增强放射敏感性的药物中的应用。
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