[发明专利]透皮肽修饰的粉葛外泌体纳米制剂在制备抗皮肤衰老产品中的应用

说明书

本发明公开了透皮肽修饰的粉葛外泌体纳米制剂在制备抗皮肤衰老产品中的应用。经透皮肽修饰的粉葛外泌体纳米制剂能有效穿透皮肤角质层，并被皮肤细胞如皮肤成纤维细胞高效摄取，从而发挥显著的抗皮肤(细胞)衰老的功能，为皮肤抗衰老提供了新的策略，所制备的透皮肽修饰的粉葛外泌体可作为一种高效、安全、制备方便的新型皮肤抗衰老美容产品，同时还可以应用于其它细胞、组织的抗衰老，用于延缓机体组织、器官的老化和功能衰退，在医疗产品和美容化妆品领域均具有巨大的市场开发前景。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及透皮肽修饰的粉葛外泌体纳米制剂在抗皮肤衰老中的应用。

背景技术

衰老是任何生物生命过程的必然规律，随着现在世界范围内人口老龄化问题日渐突出，抗衰老领域已成为全球关注的焦点。人体器官老细胞逐渐死去，而新细胞不再产生。死去的老细胞被酶分解，然后被新细胞吸收，供给新细胞生长所需的营养，不能促使旧细胞继续分裂产生更多新的细胞。长此以往，人体器官新的细胞不再产生，而原来的旧细胞不断的死亡，这样就会造成人体器官功能的不断衰退，引起各种老年疾病，到最后直至人体器官功能完全衰竭，导致人因为人体器官功能不断衰退直至衰竭而死亡。因此，有效防护器官衰老，可减少老年疾病的发生，对于实现健康老龄化，延长寿命非常重要。皮肤作为人体最大的器官，其衰老具有特殊意义。皮肤衰老不仅影响美观，还对人们生活、工作有着心理与生理影响，可能会引发抑郁、自卑等心理问题。因此，对皮肤的抗衰老治疗，是目前的研究焦点之一。

端粒酶是一种逆转录酶，由RNA和蛋白质组成，是以自身RNA为模板，合成端粒重复序列，加到新合成DNA链末端，把DNA复制损失的端粒填补起来，使端粒修复延长，可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使得细胞分裂的次数增加。但是，在正常人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控，大多出现在造血细胞、干细胞和生殖细胞这些不断分裂的细胞之中。当细胞分化成熟后，端粒酶的活性就会渐渐的消失，细胞每有丝分裂一次，就有一段端粒序列丢失，当端粒长度缩短到一定程度，会使细胞停止分裂，导致衰老与死亡。因此，端粒酶在细胞中的活性，是抗衰老中的具有重要意义的指标。

皮肤真皮中最重要的细胞成分是成纤维细胞，其数量减少、形态改变、分泌合成功能减弱或衰退与皮肤衰老密切相关。现已发现成纤维细胞诱导皮肤衰老的作用机制既有单个特定基因或蛋白的调控机制，也包含了涉及多个组合调控的作用机制。因此，将成纤维细胞应用于皮肤衰老模型的建立和研究中，可以为探讨预防和延缓皮肤老化提供新思路与研究方向，为评价抗皮肤老化药物的疗效积累经验。

因此本发明以皮肤为组织模型，以皮肤中所含的主要细胞之一(成纤维细胞)为模型细胞，对所构建的纳米制剂在对抗细胞、组织以及器官衰老方面的效果进行鉴定与评价。

但是，皮肤致密的角质层限制了绝大部分药物的经皮渗透，只有一小部分小分子药物才能直接进入表皮层。近些年来，许多研究报道了使用纳米药物载体携带药物促进药物透皮的方法，但这些纳米粒子的透皮效果往往不是很理想，生物相容性较差，对皮肤造成一定的刺激，细胞对游离药物的摄取量也很低。因此，亟需发明一种透皮效果理想，生物相容性好的纳米粒子携带抗衰老药物穿透角质层，到达表皮层、真皮层，对皮肤细胞实施干预，发挥抗皮肤衰老的美容/治疗作用。

外泌体是指由细胞分泌到细胞外微环境的一种具有膜结构的囊泡，其中含有蛋白质、核酸等多种关键组分，参与细胞间的通讯并调控细胞功能。由于外泌体是来源于细胞膜的纳米囊泡，其成分与细胞膜具有相似性，因此根据相似相溶原理，外泌体具有细胞和组织穿透的独特优势，且相较人工合成的脂质体，外泌体具备更好的生物相容性，生物可降解性，更高的包装率，低毒性，稳定性以及低免疫原性。因此，外泌体在经皮给药上可能具有巨大的潜力，目前也很少有将外泌体应用于经皮给药的报道。基于此，在外泌体上修饰透皮肽，可以在不增加纳米粒尺寸下，能够更加高效地穿透皮肤角质层，增强外泌体穿透细胞膜的作用，进而更容易被细胞所摄取。