[发明专利]一种具有自絮凝能力的菌株及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种重组菌的制备方法，包括：敲除出发菌株中的多糖合成基因，或抑制出发菌株中所述多糖合成基因的表达量，或降低出发菌株中的所述多糖合成基因编码蛋白质的含量或活性，得到目的重组菌。

2.一种提高菌株絮凝能力的方法，包括：敲除出发菌株中的多糖合成基因，或抑制出发菌株中所述多糖合成基因的表达量，或降低出发菌株中的所述多糖合成基因编码蛋白质的含量或活性，得到与所述出发菌株相比絮凝能力提高的目的重组菌。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述出发菌株为盐单胞菌(Halomonasbluephagenesis)；

和/或，所述多糖合成基因为多糖合成基因簇PS1、PS2和/或PS4中的多糖合成基因；

和/或，所述多糖合成基因编码蛋白质为所述多糖合成基因簇PS1、PS2和/或PS4中的多糖合成基因编码的蛋白质。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述多糖合成基因的敲除通过将多糖合成基因簇PS1、PS2和/或PS4敲除实现。

5.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于：所述多糖合成基因的敲除通过CRISPR/Cas9的方法实现；

进一步，

所述多糖合成基因的敲除通过向所述出发菌株中导入能表达Cas9以及靶向所述多糖合成基因簇PS1、PS2和/或PS4的sgRNA的重组载体实现；

更进一步，

能表达Cas9以及靶向所述多糖合成基因簇PS1、PS2和/或PS4的sgRNA的重组载体为能分别表达Cas9以及靶向所述多糖合成基因簇PS1、PS2和/或PS4的sgRNA的一个或多个载体。

6.利用权利要求1-5中任一所述方法得到的重组菌。

7.一种产品，为权利要求5中所述的重组载体和/或权利要求1-5中任一所述出发菌株。

8.一种菌体收集方法，包括：在用于培养出发菌株的液体培养基中培养权利要求6所述的重组菌，得到培养液，静置所述培养液或向所述培养液中添加NaCl，使菌体沉淀，弃上层液体，即得到所述重组菌菌体。

9.一种生产PHB的方法，包括：在含有葡萄糖的培养基中培养权利要求6所述的重组菌，得到PHB。

10.下述I或II的应用：

I、权利要求1-5中任一所述方法，或权利要求6所述的重组菌，或权利要求7所述的产品，或权利要求8所述的方法在生产PHB中的应用；

II、权利要求6所述的重组菌，或权利要求7所述的产品在制备生产PHB产品中的应用。