[发明专利]一种外胚间充质干细胞的分离培养设备及方法

权利要求书

1.一种外胚间充质干细胞的分离培养设备，其特征在于，包括盒体、盒盖、辅助板、减震装置、分配装置、灭菌装置和监测装置；

所述盒盖与所述盒体转动连接，并位于所述盒体的一侧；所述辅助板的一侧与所述盒体转动连接，并位于所述盒体远离所述盒盖的一侧，所述辅助板的另一侧与所述盒体可拆卸连接，且与所述盒体形成容置空间；所述分配装置与所述盒体固定连接，并位于所述容置空间内，所述灭菌装置与所述盒盖固定连接，所述监测装置与所述盒体固定连接；

所述减震装置包括减震柱、减震弹簧和固定机构，所述减震柱与所述盒体固定连接，并位于所述盒体靠近所述盒盖的一侧，所述减震弹簧与所述盒体固定连接，并套设在所述减震柱的外侧，所述固定机构与所述分配装置可拆卸连接。

2.如权利要求1所述的外胚间充质干细胞的分离培养设备，其特征在于，

所述固定机构包括安装座和卡合扣，所述安装座与所述分配装置可拆卸连接，并位于所述分配装置远离所述盒体的一侧，所述卡合扣与分配装置转动连接，并位于所述分配装置远离所述安装座的一侧。

3.如权利要求2所述的外胚间充质干细胞的分离培养设备，其特征在于，

所述固定机构还包括防护圈，所述防护圈与所述卡合扣固定连接，并位于所述卡合扣远离所述分配装置的一侧。

4.如权利要求2所述的外胚间充质干细胞的分离培养设备，其特征在于，

所述安装座具有限位槽，所述限位槽位于所述安装座远离所述分配装置的一侧。

5.如权利要求1所述的外胚间充质干细胞的分离培养设备，其特征在于，

所述外胚间充质干细胞的分离培养设备还包括提手，所述提手与所述盒体固定连接，并位于所述盒体远离所述盒盖的一侧。

6.如权利要求1所述的外胚间充质干细胞的分离培养设备，其特征在于，

所述外胚间充质干细胞的分离培养设备还包括固定锁，所述固定锁的一侧与所述盒体固定连接，并位于所述盒体靠近所述辅助板的一侧，所述固定锁的另一侧与所述盒盖可拆卸连接。

7.一种外胚间充质干细胞的分离培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

在无菌条件下收集外胚细胞组织，放入装有细胞保存液的试剂瓶内，并密封运输至实验室内；

使用洗涤液对外胚细胞组织进行清洗；

将清洗处理后的外胚细胞组织切成1至2mm³的组织碎块，并将组织碎块均匀铺在培养皿或培养瓶底部，放置5至15分钟直至组织碎块紧贴在培养皿或培养瓶上；

将配置好的全培养基加入至培养皿或培养瓶中，至组织碎块湿润；

将加入有全培养基的培养皿或培养瓶中放进二氧化碳浓度为5％的37℃的培养箱中进行培养，每1至3天进行一次更换全培养基，培养至5至10天得到P0代间充质干细胞；

继续培养至10至14天，当培养皿或培养瓶中细胞融合率达到50至70％时，使用洗涤液清洗两次，同时加入消化液，震荡摇晃培养皿或培养瓶，使消化液与细胞充分接触，继续放入培养箱中消化30至60秒；

向消化后的培养皿或培养瓶中加入配置的全培养基终止消化，即得到P1代间充质干细胞，取出一部分P1代间充质干细胞放入冻存液中进行冻存，剩余的P1代间充质干细胞根据需要按照1：3比例进行传代培养。